花生白藜芦醇合酶基因转化烟草与番茄的初步研究

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本文阐述了白藜芦醇合酶基因的研究进展,对不同植物来源白藜芦醇合酶基因的克隆和结构进行比较,分析该基因的诱导和表达特性,并对该基因转基因植物的性状进行讨论。为了对白藜芦醇合酶功能进一步研究,本研究拟将白藜芦醇合酶基因导入烟草和番茄。 本研究以从花生中克隆的白藜芦醇合酶基因为目的基因,利用植物表达载体pCAMBIA1302,构建了含目的基因的植物重组表达载体pB6RS,并利用电穿孔法将pB6RS质粒直接导入根癌农杆菌LBA4404中。 通过农杆菌介导将pB6RS转化烟草(云烟85),得到60株抗性再生植株,通过PCR检测,有32株呈阳性,目的基因PCR阳性植株的转化频率约16%。 以番茄(合作903)子叶为受体材料,确定最佳不定芽分化培养基为MS+1 mg/L6-BA,不定芽分化率为100%,平均不定芽数为5.6。农杆菌遗传转化番茄子叶优化条件为外植体无需预培养,农杆菌菌液OD<,600>为0.1左右,浸泡时间为5-10 min,共培养时间为2天。通过农杆菌介导将pB6RS转化番茄,最终得到33株抗性再生苗,通过PCR检测,有15株呈阳性,目的基因PCR阳性植株的转化频率为1.5%。
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