目前害虫对Bt的抗药性问题已经成为研究热点，因此国内外研究者都在积极寻找新的应对昆虫抗药性的途径。人工合成的Tat肽具有能够与其它大分子的蛋白组成融合蛋白穿透细胞膜进入细胞内的特性，国内已经有研究者首次将Tat肽引入农业害虫防治领域，在原核中对CrylAc杀虫基因的增效作用已经得到验证，对抗性小菜蛾种群的的增效倍数达到9.69倍。因此将利用遗传重组方法构建的Bt杀虫基因与Tat基因的融合基因转入模式植物，明确Tat蛋白在植物体系中的表达对Bt杀虫基因的增效作用，从而开辟Tat应用的新领域和克服害虫抗药性的新途径。 本课题将Tat肽应用到植物转基因工程中，验证Tat肽在植物体系中对CrylA杀虫基因的增效功能。通过PCR扩增从转双价基因抗虫棉中的DNA基因组中克隆到了包含启动子、增强子、poly A序列、终止子等一系列调控元件的完整的CrylA杀虫基因的表达盒，优化Tat基因的表达密码子，设计并合成了Tat基因序列，为了检测融合基因在模式植物中的表达，将黄色荧光蛋白YFP作为标记基因利用遗传重组的方法构建了一个携带Tat和YFP基因的完整的CrylA杀虫基因的表达盒。同时为了研究各目的基因之间的相互影响和Tat的功能，分别构建pBI121-CrylA、pBI121-Fat-CrylA、pBI121-Tat-CrylA-YFP、pBI121-Tat-CrylA和pBI121-CrylA-YFP(对照)四种植物表达载体，.将其导入根癌农杆菌GV3101中，同时建立了完整的模式植物转化体系，分别利用花絮侵染法和叶盘法转化至拟南芥和烟草中，获得转基因植株。通过对标记基因的检测和抗性植株的筛选，结果表明融合基因表达载体已经成功转入烟草和拟南芥，并在植物组织内表达，为后续筛选稳定遗传的阳性克隆植株以及为明确Tat在植物中表达后对抗性害虫的治理作用奠定理论和实践基础。