核桃楸外果皮有效成分的提取及生物活性研究

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采用超声辅助提取法以乙醇-水混合溶液浸提核桃楸外果皮粉末,以紫外分光光度法测定胡桃醌含量,优化并确定最佳提取条件。经气象色谱及GC-MS检测发现以40%乙醇为提取剂的核桃楸外果皮胡桃醌提取物中共含两种物质。分别为,目标提取物胡桃醌,相对含量84.84%;(1R)-2,2-双甲基-3-亚甲基二环[2.2.1]庚烷,相对含量9.32%。萃取剂氯仿中所带入的杂质总共约占5.84%。将胡桃醌提取物用柱色谱分离纯化,经高效液相色谱检测后,浓缩并蒸干溶剂得橙红色针状晶体,经核磁共振检测确定为胡桃醌且纯度较高。采用超声法对核桃楸外果皮及叶单宁进行提取,利用紫外分光光度法和磷钼酸-磷钨酸比色法(F-D法)测定核桃楸单宁含量,并计算提取率。分别采用单一变量法和正交试验法优化核桃楸单宁提取工艺并确定出最佳提取条件。单变量法得出核桃楸外果皮单宁的最佳提取条件为:丙酮体积分数40%、料液比1:20、超声温度50℃、超声时间30 min、超声功率105W。核桃楸叶单宁的最佳提取条件为:丙酮体积分数40%、料液比1:20、超声温度40℃、超声时间30 min、超声功率90 W。选取丙酮体积分数、超声温度、超声时间、料液比等4个因素,每个因素选择3个水平。采用L9(34)正交试验法优化核桃楸外果皮及叶单宁提取工艺。核桃楸外果皮单宁的最佳提取条件为:丙酮体积分数40%、超声温度40℃、超声时间40 min、料液比1:15。核桃楸叶单宁的最佳提取条件为:丙酮体积分数50%、超声温度60℃、超声时间30 min、料液比1:20。对核桃楸单宁进行抗氧化能力及抑菌活性测定。结果显示核桃楸外果皮及叶单宁对亚硝酸根离子、羟基自由基及超氧阴离子均有较强清除能力。核桃楸外果皮单宁对亚硝酸根离子有最强抗氧化能力,而核桃楸叶单宁对超氧阴离子有最强抗氧化能力。核桃楸叶单宁对三种自由基的清除能力即抗氧化性整体上强于核桃楸外果皮单宁。核桃楸外果皮及叶单宁对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌均有抑制作用。以二倍稀释法确定出核桃楸外果皮单宁对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为1.61 mg/L,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.81 mg/L。核桃楸叶单宁对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌的最低抑菌浓度均为1.54mg/L。
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