探讨熊果酸对干扰素γ (IFN-γ)刺激HaCaT细胞产生白细胞介素33(IL-33)的影响及其机制。
方法不同浓度熊果酸(0、0.1、1、5、10、20、40、80 μmol/L)分别刺激HaCaT细胞24、48、72 h, MTT法检测其对细胞增殖的影响。将HaCaT细胞与200 μg/L IFN-γ共培养建成炎性细胞模型，再与10和15 μmol/L熊果酸共培养，以IFN-γ诱导的HaCaT炎性细胞模型为对照，探讨熊果酸的抗炎作用，RT-PCR法检测IL-6和IL-33 mRNA的表达，Western印迹法检测IL-33、p-ERK1/2和ERK1/2蛋白的表达。
结果MTT法检测显示，5～20 μmol/L熊果酸作用24 h对细胞活力影响不大，而40～80 μmol/L熊果酸在各个时间点均可明显抑制HaCaT细胞增殖(P < 0.05)，故后续实验采用10和15 μmol/L浓度。HaCaT细胞经IFN-γ刺激后，IL-33 mRNA (0.812±0.036)、IL-6 mRNA (0.947±0.091)表达量和IL-33蛋白表达(1.317±0.119)均显著高于空白对照组(分别为0.412±0.021、0.595±0.030和0.147±0.036，均P < 0.05)；而IFN-γ + 10 μmol/L熊果酸组(分别为0.447±0.042、0.437±0.099和0.923±0.058)和IFN-γ+ 15 μmol/L熊果酸组(分别为0.438±0.028、0.350±0.075和0.564±0.113)又较IFN-γ组(分别为0.812±0.036、0.947±0.091和1.317±0.119)显著降低(均P < 0.05)，且这两个熊果酸组IL-33 mRNA水平与空白对照组相比差异无统计学意义(P > 0. 05)，而IFN-γ+ 15 μmol/L熊果酸组IL-33蛋白水平显著低于IFN-γ+ 10 μmol/L熊果酸组(P < 0.05)。HaCaT细胞分别经IFN-γ刺激5、60 min后，p-ERK1/2蛋白表达均明显高于空白对照组。IFN-γ+ 15 μmol/L熊果酸5 min组和60 min组p-ERK1/2蛋白的相对表达量(0.458±0.053、0.302±0.054)分别低于IFN-γ 5 min组(0.941±0.042)和60 min组(0.509±0.032)，差异均有统计学意义(P < 0.05)，而总ERK1/2蛋白表达量不变。
结论熊果酸能够降低IFN-γ刺激的HaCaT细胞IL-33的表达量，其机制可能与调节ERK信号通路相关蛋白的表达有关。