【摘 要】
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通过实验确定了采用异硫氰酸胍和β-巯基乙醇联合变性,酚、氯仿、异戊醇抽提的方法,从一株次生代谢产物为苝醌衍生物的丝状真菌AL18中提取总RNA。经甲醛变性凝胶电泳分析和紫
【机 构】
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四川农业大学原子能应用研究室,山东理工大学生命科学学院,四川农业大学原子能应用研究室 四川雅安625014,山东理工大学生命科学学院,山东淄博255049,山东淄博255049,四川雅安625014
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通过实验确定了采用异硫氰酸胍和β-巯基乙醇联合变性,酚、氯仿、异戊醇抽提的方法,从一株次生代谢产物为苝醌衍生物的丝状真菌AL18中提取总RNA。经甲醛变性凝胶电泳分析和紫外分光光度法检测,证实得到了完整、均一的总RNA,为构建此菌的cDNA文库和克隆生物合成关键基因奠定了基础。
Through experiments, we determined the total phenolic compounds extracted from filamentous fungi AL18 with secondary metabolites of perylenequinone by the combination of guanidine isothiocyanate and β-mercaptoethanol, phenol, chloroform and isoamyl alcohol RNA. After denaturing gel electrophoresis and UV spectrophotometry, it was confirmed that a complete and homogeneous total RNA was obtained, which laid the foundation for the construction of the cDNA library of this bacterium and the cloning of biosynthetic key genes.
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