【摘 要】
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目的构建RIG-I蛋白2CARD结构域真核表达载体及其在He La细胞中的表达定位。方法RIG-I是一种模式识别受体,它能够参与由MAVS介导的NF-κB天然抗病毒免疫反应。2CARD(Caspase a
【基金项目】
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国家自然科学基金(31300145、31570159);黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(12541578);中国博士后科学基金面上项目(2016M590297);黑龙江省政府博士后资助经费(LBH-Z15188);黑龙江八一农垦大学博士科研启动基金(XDB2015-16);黑龙江八一农垦大学大学生创新创业训练计划项目(XC2015051)
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目的构建RIG-I蛋白2CARD结构域真核表达载体及其在He La细胞中的表达定位。方法RIG-I是一种模式识别受体,它能够参与由MAVS介导的NF-κB天然抗病毒免疫反应。2CARD(Caspase activation and recruitment domain,CARD)结构域是视黄酸诱导基因-I(Retinoin acid inducible gene I,RIG-I)N端的2个串联重复的半胱天冬酶激活招募区,在病毒侵染细胞过程中,2CARD结构域发挥了识别并启动机体免疫应答的功能。本研究通过PCR获取2CARD片段酶切后,与p CMV-Myc载体连接后转染He La细胞,在He La细胞中表达,并应用Western Blot和免疫荧光进行鉴定。结果 2CARD基因在He La细胞中成功表达。结论本研究成功构建了p CMV-Myc-RIG-I-2CARD真核表达载体,通过将RIG-I分子中负责信号转导的2CARD在He La中表达,为研究病毒与RIG-I的互作关系奠定一定的基础。
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