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小鼠前列腺干细胞抗原的原核表达、纯化及抗原活性检测

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mackolxsbou
【摘 要】
：
目的 RT-PCR扩增小鼠前列腺干细胞抗原（mPSCA）基因,构建原核表达质粒pET-42a-mPSCA,诱导mPSCA蛋白表达并纯化,并检测mPSCA蛋白的抗原活性。方法利用RT-PCR的方法从小鼠前列腺癌
【作 者】
：
董金凯 罗津 阎瑾琦 张亮 高江平 于继云 
【机 构】
：
中国人民解放军总医院泌尿外科,军事医学科学院基础医学研究所,湖南省永州市人民医院
【出 处】
：
南方医科大学学报
【发表日期】
：
2012年4期
【关键词】
：
前列腺干细胞抗原 原核表达 蛋白纯化 前列腺癌 prostate stem cell antigen  prokaryotic expression  prot 
【基金项目】
：
国家自然科学基金（30840094）, 国家高技术研究发展计划（863）项目（2007AA02Z451）
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目的 RT-PCR扩增小鼠前列腺干细胞抗原（mPSCA）基因,构建原核表达质粒pET-42a-mPSCA,诱导mPSCA蛋白表达并纯化,并检测mPSCA蛋白的抗原活性。方法利用RT-PCR的方法从小鼠前列腺癌细胞系RM-1细胞中扩增mPSCA基因,测序正确后PCR的方法去掉mPSCA的信号肽序列将其克隆至原核表达载体pET-42a中构建重组载体pET-42a-mPSCA。将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达,随后将表达的融合蛋白进行纯化。经SDS-PAGE分析后,Western blot检测纯化
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