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以克隆载体pGEMT—PVY—NHC为模板，用PCR方法获得HC—Pro基因，构建表达载体pPIC9K—HC，将重组质粒经Sal I单酶切后电转化Pachia pichia GS115菌株，筛选出对G418有高抗性和在MM培养基上生长缓慢的转化子。经摇瓶发酵和1％甲醇诱导后，SDS—PAGE检测发酵液上清，在66kD处有1个特异条带表达，目的条带蛋白占上清液总蛋白的40％。Western blot鉴定表明，表达蛋白可以和HC抗体发生结合反应。