小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jjjjjjj7

【摘要】

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介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列C

【作者】

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胡学军张志超包永明杨青安利佳

【机构】

：

大连理工大学生物工程系

【出处】

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中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

：

小肽多拷贝基因表达载体高效表达定向插入 EcoT14Ⅰ multiple copies peptide gene unidirectional inse

【基金项目】

：

辽宁省科技计划

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介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体;在小肽基因两端分别引进编码Factor Xa和羟胺蛋白切割位点的序列,表达出的融合蛋白可被Factor Xa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽.不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中均获

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