目的建立荧光微球时间分辨免疫层析技术检测血清中甲胎蛋白(AFP)的反应体系并对该法进行评价。方法以包裹有Eu螯合物的荧光微球作为标记物,共价偶联抗AFP的单克隆抗体AC18#,将抗AFP单克隆抗体AC17#和羊抗鼠抗体喷涂于硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,制作免疫层析试纸条。结果标准曲线经Log-Log B函数处理,检测AFP的线性范围为0.03~1 000 U/ml,批内和批间变异系数(CV)分别为5.35%和8.94%,平均回收率为98.45%。该法检测100例健康人员的AFP水平为(2.04±1.92)U/ml,正常参考值为5.80 U/ml,与时间分辨免疫分析法(TRFIA)检测AFP有较好的相关性,r=0.978(P<0.05)。结论本研究建立的荧光微球时间分辨免疫层析具有快速、灵敏、简便、经济、可单人份操作等优点,为检测AFP提供了一种高效的新途径,符合我国国情,便于临床推广。