目的探讨远华蟾毒精对小鼠乳腺癌细胞侵袭的抑制作用及其机制。方法将培养好的小鼠乳腺癌细胞4T1随机分为A、B、C、D组。A组常规培养;B、C、D组于缺氧条件下(37℃、5%CO、95%N2)进行培养,同时C、D组分别加入0.1、0.5μmol/L远华蟾毒精进行培养。培养0、6、12、24 h采用划痕实验检测细胞迁移能力(迁移距离),用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞数),用Western blotting法检测细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及磷酸化的磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果不同时点细胞迁移距离D组<C组<B组<A组,穿膜细胞数D组<C组<B组<A组,HIF-1α、MMP-9、p-PI3K、p-Akt蛋白相对表达量D组<C组<B组<A组,以上指标两组间比较差异有统计学意义(P均<0.05)。结论远华蟾毒精可能通过PI3K/AKT通路降低小鼠乳腺癌细胞HIF-1α、MMP-9的表达,从而抑制细胞侵袭。