【摘 要】
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目的探讨肝豆状核变性(WD)发病的分子生物学机制.方法通过外科手术获得3例WD患者、2例对照者的肝活检标本,利用胶原酶温育消化法分离肝细胞,并进行体外原代培养;肝细胞裂解离
【机 构】
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中山医科大学附属第一医院神经科广东省广州市510080中山医科大学附属第一医院神经科广东省广州市510080中山医科大学附属第一医院神经科广东省广州市510080中山医科大学附属第一医院神经科广东省广
【基金项目】
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卫生部临床学科重大项目(No.37091、卫生部及广东省共建中山医科大学"211工程”重点建设项目及广东省自然科学基金项目(No.960128)资助课题.
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目的探讨肝豆状核变性(WD)发病的分子生物学机制.方法通过外科手术获得3例WD患者、2例对照者的肝活检标本,利用胶原酶温育消化法分离肝细胞,并进行体外原代培养;肝细胞裂解离心后,使用6%聚丙烯酰胺凝胶行SDS-PAGE电泳,分离WD蛋白;以抗人WD蛋白抗体为第一抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体为第二抗体,对肝细胞WD蛋白进行Westem-blot印迹检测,观察特异性条带数目、密度深浅和分子量大小;同时采用荧光PCR技术,筛查所有研究对象WD基因8号外显子(exon8)的突变情况,对异常者进行DNA直接
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