【摘 要】
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Alice Ting实验室开发的抗坏血酸过氧化物酶（engineered ascorbate peroxidase,APEX）,相对于经典的辣根过氧化物酶（horse radish peroxidase,HRP）,其酶活性不再受细胞内蛋白质定位的影响,可以在几乎所有的亚细胞区域保持活性,这使其在研究亚细胞尺度以及活细胞水平生物学问题时极具优势.目前,基于APEX的二氨基联苯胺（diaminoben
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31770891,31400703,31770900）~~；
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Alice Ting实验室开发的抗坏血酸过氧化物酶（engineered ascorbate peroxidase,APEX）,相对于经典的辣根过氧化物酶（horse radish peroxidase,HRP）,其酶活性不再受细胞内蛋白质定位的影响,可以在几乎所有的亚细胞区域保持活性,这使其在研究亚细胞尺度以及活细胞水平生物学问题时极具优势.目前,基于APEX的二氨基联苯胺（diaminobenzidine,DAB）染色标记技术已经成功地实现对全细胞、亚细胞器和蛋白质水平的电镜成像.同时,与质谱技术结合,基于APEX的活细胞生物素邻近标记方法也极大地推动了亚细胞器蛋白质组学,以及目标蛋白在特定时空条件下邻近蛋白质组学的研究发展.本文将从以上两个方面阐述APEX技术的基本原理及最新应用进展,并讨论和展望其在实际应用中存在的局限性和挑战.
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