论文部分内容阅读
摘要：近年来，广西番茄黄化曲叶病毒病（TYLCD）发生较为严重，病原也比较复杂（发现4 种病毒且存在复合侵染现象），对广西的番茄生产造成了很大威胁，种植抗病品种是防治该病的关键措施。本研究对中国农科院蔬菜花卉所、上海市农科院园艺所、浙江省农科院蔬菜所、江苏省农科院蔬菜所、北京市农林科学院蔬菜研究中心和广西大学提供的43 份抗TYLCD番茄品种在广西南宁的自然抗病性进行了评价。采用自然诱发的方法，病圃的番茄混合感染中国番茄曲叶病毒与中国番木瓜曲叶病毒。试验结果表明，表现高抗的品种有‘浙红3号’、‘浙红4号’、‘K22’、‘K64’等8个番茄品种，表现抗病和中抗的品种有‘红贝贝’、‘春展56’等25 个品种，表现感病的品种有‘樱红1号’、‘K6’等5 个品种，表现高感的品种有‘金陵佳玉’、‘苏粉11号’等5 个品种。本试验结果为抗病番茄品种在广西乃至全国的推广和布局提供参考。
关键词：番茄黄化曲叶病毒病； 抗病品种； 自然抗病性
中图分类号： S 432.21
文献标识码： B
番茄黄化曲叶病（Tomato yellow leaf curl disease，TYLCD）是一类严重危害番茄生产的病害， 引起该病的病原在分类上都属于双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）。在自然条件下，该属病毒主要通过烟粉虱（Bemisia tabaci）以持久方式传播蔓延，因此也称为粉虱传双生病毒（whiteflytransmitted geminivirus，WTGs）[1]。目前，这类病毒已在亚洲、非洲、地中海地区、中北美洲及加勒比海等地的众多国家和地区造成严重危害，我国的广西、广东、云南、浙江、江苏、山东、上海、北京等10 多个省份均有发生，对生产已造成严重危害[29]。
WTGs侵染番茄后，症状主要表现为植株生长缓慢或停滞，严重矮缩，顶部叶片黄化变小，叶片边缘向上卷曲，无法正常开花结果；后期感染，染病植株仅上部叶片和新芽表现症状，结果量减少，果实变小。该病具有发病率高、危害大、防治难、传播效率高等特点。目前，生产上主要的防治措施有：培育无病壮苗、黄板诱杀烟粉虱、化学农药防治、换茬轮作，培育抗病品种等，其中培育抗病品种是防治该病的根本。前人已对番茄品种的抗病性进行了较多报道，田兆丰等[10]综合分析了20 多个番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性，筛选出了3 份抗病品种；矫晓阳等[11]利用5种双生病毒的侵染性克隆对‘浙杂502’、‘浙粉701’、‘浙粉702’等3个品种进行了抗病性鉴定。结果发现，这3个品种对这5种双生病毒均具有较好的抗性。孔令娟等[12]对6 个抗黄化曲叶病毒病的番茄品种抗性进行了评价，发现番茄品种种植地域不同，其抗病性表现会有所差异。目前，市售的番茄种子有较多的品种均标注为抗病品种，然而，由于地域及抗病基因和病毒种类的不同造成番茄品种的抗性表现有较大差异，笔者对中国农科院蔬菜花卉所等单位提供的抗TYLCD番茄品种在广西南宁进行了烟粉虱自然接种抗病性评价。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 番茄品种来源
供试的番茄品种共43个，其中‘K6’、‘K22’、‘K36’、‘K54’、‘K61’、‘K64’、‘K72’ 由上海农科院园艺所提供；‘浙红1号’、‘浙红2号’、‘浙红3号’、‘浙红4号’、‘浙樱粉1号’、‘浙樱粉2号’等由浙江农科院蔬菜所提供；‘13HZ2’、‘13HZ4’、‘13HZ5’、‘13HZ11’、‘13HZ12’、‘3156’、‘1361’、‘1362’、‘1363’、‘1364’ 由中国农科院蔬菜花卉所提供；‘金陵甜玉’、‘金陵秀玉’、‘金陵宝玉’、‘金陵佳玉’、‘金陵黛玉’、‘苏粉11号’、‘苏粉12号’、‘苏粉13号’、‘JSTY13S41’、‘JSTY13S42’由江苏农科院蔬菜所提供；‘红贝贝’、‘佳红8号’、‘春展56’、‘秋光140’、‘秋光277’由北京市农林科学院蔬菜研究中心提供；‘西大1号’、‘西大2号’、‘樱黄1号’、‘樱黄2号’、‘樱红1号’由广西大学提供。感病对照为‘超级大明星’（市售），抗病对照为‘T117’，由南宁市立新公司提供。
1.1.2 试剂及PCR引物
2×Taq Master Mix 购自北京康为世纪生物科技有限公司，SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司，PGEMT Easy Vector 试剂盒购自Promega，NaOH为国产分析纯试剂。
PCR引物参考AV494/CoPR[1314]委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 番茄培育及病毒接种
试验地点为广西农科院植保所网室内，网室常年种植有番茄黄化曲叶病毒病病株，且烟粉虱虫量较大。所有的番茄试验材料于2013年9月4日采用穴盘法进行育苗，待幼苗长至5～6 叶期于10月1日移栽至盆中，每个品种移栽20 株，移栽后，将盆栽苗放置于网室内进行自然接种，定期调查植株发病情况，10月19日进行第1 次调查，10月29日进行第2 次调查。
1.2.2 PCR检测及序列分析
采集网室内发病的‘超级大明星’番茄样品8份，用NaOH 粗提法进行DNA的提取[15]，将提取液用0.1 mol/L TrisHCl稀释50 倍进行PCR扩增。所得PCR产物克隆至PGEMT Easy Vector，进行序列测定，测序工作由北京诺赛基因组研究中心有限公司完成。
病情调查完成后，采集各品种未表现症状的番茄叶片各1份（如果一个品种中有多株未发病植株则作为混合样采集），用NaOH粗提法提取各样品的总DNA，将提取液用0.1 mol/L TrisHCl稀释50 倍进行PCR检测。 1.2.3 病情调查与分析
每个番茄品种调查20 株，采用Lapidot 和Friedmann[16]的病情分级标准记录病情和计算病情指数；按发病的严重程度划分为0、1、3、5、7、9共6个等级，病情分级如下：
0级：无症状；
1级：顶端叶片的叶缘轻微发黄；
3级：羽状复叶的小叶末端黄化和轻微卷曲；
5级：多数叶片黄化，卷曲，边缘上翘；
7级：叶片显著黄化，上翘，卷曲，植株矮化；
9级：叶片极度黄化，卷曲，植株严重矮化，甚至停止生长。
发病率（%）=（发病株数/调查总株数）×100；
病情指数（DI）=∑（级别代表值×本级病株数）/ （调查总株数×最高级代表值）×100；
抗病评价标准（参考叶青静等[17]）：
高抗（HR）：075。
2 结果与分析
2.1 病情调查及抗病性评价
番茄植株接种后，每周观察番茄植株的发病情况，到第3周进行第1次调查，第5周进行第2次调查，计算各品种的病情指数并进行分析，参考抗病性评价标准进行抗病性鉴定（结果见表1）。
接种3 周后，除抗病对照未表现症状外，其余各番茄品种均表现出番茄黄化曲叶病毒病的典型症状；接种5 周后（表1），各番茄品种均有发病，发病最为严重的为‘金陵佳玉’与‘苏粉11号’，病情指数分别达到100与81.94；其余各供试品种病情指数在3.47～79.17。其中感病对照‘超级大明星’发病率达100 %，病情指数达到73.61，抗病对照‘T117’发病率为5 %，病情指数为0.69。
从表1可以看出，携带Ty3a基因的番茄品种抗性最好，大部分表现高抗，但也有例外，‘浙红1号’等4个品种表现抗病和中抗，‘K6’和‘苏粉11号’表现感病和高感；携带Ty1/Ty3 和Ty3基因的番茄品种抗性表现中等；而携带Ty2 基因的番茄品种抗性表现较差，表现抗、中抗、感病甚至高感。
2.2 病毒种类分子鉴定
在自然接种区共采集8份感病的‘超级大明星’番茄植株叶片样品，提取总DNA后，用AV494/CoPR引物进行扩增，PCR产物经纯化后连接至载体进行序列测定，测序结果经GenBank，BLASTN分析表明，感病植株均为中国番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl China virus，ToLCCNV）与中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus ， PaLCuCNV）复合侵染。
2.3 未表现症状番茄植株的PCR检测
各番茄品种中部分未表现症状的16 份番茄样品PCR检测结果表明，‘浙红1号’、‘樱粉1号’等未显症的番茄品种也携带病毒，仅有‘金陵甜玉’等几个品种未检测出病毒（图1）。
3 结论与讨论
烟粉虱传双生病毒（WTGs）在自然界由于基因重组突变容易导致病毒变异，从而引起品种抗性丧失，导致病害暴发流行[18]。据报道，世界上引起番茄黄化曲叶病毒病的病原超过57种，侵染我国番茄的双生病毒至少有10种[19]。江苏、北京等地的番茄黄化曲叶病毒病主要病原为番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）[6，9]，浙江省主要病原为TYLCV和台湾番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl Taiwan virus，ToLCTwV）[7]，广西番茄双生病毒发生频率最高的是PaLCuCNV和ToLCCNV两种。试验结果表明，各番茄品种在广西南宁的抗性表现与其在品种提供单位所在地的表现差异较大，上海农科院与浙江农科院提供的‘K22’、‘浙红3号’等8个番茄品种表现为高抗，‘红贝贝’、‘春展56’等25 个番茄品种仅表现抗病和中抗， ‘樱红1号’、‘K6’ ‘金陵佳玉’、‘苏粉11号’等表现感病甚至高感。
番茄品种所携带的抗病基因与番茄品种的抗病性密切相关，含有Ty1、Ty2、Ty3、Ty4及Ty5其中1 个抗性基因的番茄品系，对番茄黄化曲叶病毒病都有一定抗性，但抗性水平不等[16]。本研究中上海农科院与浙江农科院的番茄品种普遍携带Ty3a抗性基因，江苏农科院的番茄品种除‘苏粉11号’与‘苏粉13号’携带Ty3a外，其余品种材料均携带Ty2基因，从试验结果可以看出，携带Ty3a基因的番茄品种普遍对PaLCuCNV和ToLCCNV有较好的抗性，携带Ty3 基因和携带Ty1/Ty3 基因的番茄品种对PaLCuCNV和ToLCCNV也表现出了较好的抗性，携带Ty3 基因的番茄品种对PaLCuCNV有较好抗性；另外，携带Ty2基因的番茄品种部分表现高感，部分表现中等及以上抗性，该研究结果与矫晓阳等[11]研究结果部分吻合，但含有Ty3a 的‘苏粉11号’和‘K6’抗性表现较差，原因还有待查明。
本研究对部分未显现症状的番茄植株进行了PCR检测，检测结果表明，这些番茄植株虽然未显现症状，但是同样受到病毒侵染，未发现免疫的番茄品种。
由于参试番茄株数偏少，接种压力偏大，也未进行测产，试验结果不一定完全反映各品种在田间的自然抗耐病性，仅供有关育种部门参考。
参考文献
[1] Harrison B D， Robinson D J. Natural genomic and antigenic variation in whiteflytransmitted geminiviruses （Begomoviruses） [J]. Annual Review of Phytopathology，1999，37：369398. [2] 蔡健和，秦碧霞，朱桂宁，等.番茄黄化曲叶病毒病在广西暴发的原因和防治策略[J]. 中国蔬菜， 2006（7）： 4748.
[3] 何自福，虞皓，毛明杰，等.中国台湾番茄曲叶病毒侵染引起广东番茄黄化曲叶病[J].农业生物技术学报，2007，15（1）：119123.
[4] 王玉，丁铭，杨莉，等. 侵染番茄的中国番木瓜曲叶病毒基因组结构特征[J]. 西南农业学报， 2010， 23（6）：19171922.
[5] 褚栋，侯丽霞，刘国霞，等. 山东省局部地区番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定[J]. 山东农业科学， 2010， 42（2）：1315.
[6] 赵统敏，余文贵，周益军，等. 江苏省番茄黄化曲叶病毒病 （TYLCD）的发生与诊断初报[J]. 江苏农业学报， 2007， 23 （6）：654655.
[7] 袁伟，万红建，王荣青，等. 浙江省番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定及序列分析[J].分子植物育种，2013，11（2）：185192.
[8] 宋晰，师迎春，张世晨，等. 北京地区番茄黄化曲叶病病毒分离物测定及株系的初步鉴定[J]. 植物病理学报， 2013，43 （2）：113119.
[9] 田守波，张辉，于力，等. 上海地区番茄黄化曲叶病症状多样性与分子鉴定[J]. 上海农业学报， 2012， 28（3）：15.
[10]田兆丰，刘伟成，谢欢，等. 不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性鉴定[J]. 植物保护学报， 2013， 40（1）：5660.
[11]矫晓阳，周雪平，杨悦俭，等. 不同番茄品种对5种植物双生病毒的抗病性鉴定[J]. 植物病理学报， 2013， 43（6）：655658.
[12]孔令娟，潘红，陈红辉，等. 番茄抗黄化曲叶病毒病品种筛选试验[J]. 北方园艺， 2011（22）：1315.
[13]Wyatt S D， Brown J K. Detection of subgroup Ⅲ geminivirus isolates in leaf extracts by degenerate primers and polymerase chain reaction [J]. Phytopathology， 1996， 86：12881293.
[14]何自福，虞皓，罗方芳. 番茄烟粉虱传双生病毒PCR检测[J]. 中国病毒学，2004，19（1）：6769.
[15]李正和，李桂新，谢艳，等. 云南番茄曲叶病是由烟草曲茎病毒引起的[J]. 病毒学报，2002，18（4）：355361.
[16]Lapidot M， Friedmann M. Breeding for resistance to whiteflytransmitted geminiviruses [J]. Annals of Applied Biology， 2002，140：109127.
[17]叶青静，周国治，王荣青，等. 番茄黄化曲叶病毒病抗性鉴定技术研究[J]. 分子植物育种， 2011， 9（2）：210217.
[18]Zhou X P， Liu Y L， Calvert L，et al. Evidence that DNAA of a geminivirus associated with severe cassava mosaic disease in Uganda has arisen by interspecific recombination [J]. Journal of General Virology，1997， 78：21012111.
[19]张辉.侵染我国番茄双生病毒种类鉴定及致病性分析[D]. 杭州：浙江大学， 2009.
关键词：番茄黄化曲叶病毒病； 抗病品种； 自然抗病性
中图分类号： S 432.21
文献标识码： B
番茄黄化曲叶病（Tomato yellow leaf curl disease，TYLCD）是一类严重危害番茄生产的病害， 引起该病的病原在分类上都属于双生病毒科（Geminiviridae）菜豆金色花叶病毒属（Begomovirus）。在自然条件下，该属病毒主要通过烟粉虱（Bemisia tabaci）以持久方式传播蔓延，因此也称为粉虱传双生病毒（whiteflytransmitted geminivirus，WTGs）[1]。目前，这类病毒已在亚洲、非洲、地中海地区、中北美洲及加勒比海等地的众多国家和地区造成严重危害，我国的广西、广东、云南、浙江、江苏、山东、上海、北京等10 多个省份均有发生，对生产已造成严重危害[29]。
WTGs侵染番茄后，症状主要表现为植株生长缓慢或停滞，严重矮缩，顶部叶片黄化变小，叶片边缘向上卷曲，无法正常开花结果；后期感染，染病植株仅上部叶片和新芽表现症状，结果量减少，果实变小。该病具有发病率高、危害大、防治难、传播效率高等特点。目前，生产上主要的防治措施有：培育无病壮苗、黄板诱杀烟粉虱、化学农药防治、换茬轮作，培育抗病品种等，其中培育抗病品种是防治该病的根本。前人已对番茄品种的抗病性进行了较多报道，田兆丰等[10]综合分析了20 多个番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性，筛选出了3 份抗病品种；矫晓阳等[11]利用5种双生病毒的侵染性克隆对‘浙杂502’、‘浙粉701’、‘浙粉702’等3个品种进行了抗病性鉴定。结果发现，这3个品种对这5种双生病毒均具有较好的抗性。孔令娟等[12]对6 个抗黄化曲叶病毒病的番茄品种抗性进行了评价，发现番茄品种种植地域不同，其抗病性表现会有所差异。目前，市售的番茄种子有较多的品种均标注为抗病品种，然而，由于地域及抗病基因和病毒种类的不同造成番茄品种的抗性表现有较大差异，笔者对中国农科院蔬菜花卉所等单位提供的抗TYLCD番茄品种在广西南宁进行了烟粉虱自然接种抗病性评价。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 番茄品种来源
供试的番茄品种共43个，其中‘K6’、‘K22’、‘K36’、‘K54’、‘K61’、‘K64’、‘K72’ 由上海农科院园艺所提供；‘浙红1号’、‘浙红2号’、‘浙红3号’、‘浙红4号’、‘浙樱粉1号’、‘浙樱粉2号’等由浙江农科院蔬菜所提供；‘13HZ2’、‘13HZ4’、‘13HZ5’、‘13HZ11’、‘13HZ12’、‘3156’、‘1361’、‘1362’、‘1363’、‘1364’ 由中国农科院蔬菜花卉所提供；‘金陵甜玉’、‘金陵秀玉’、‘金陵宝玉’、‘金陵佳玉’、‘金陵黛玉’、‘苏粉11号’、‘苏粉12号’、‘苏粉13号’、‘JSTY13S41’、‘JSTY13S42’由江苏农科院蔬菜所提供；‘红贝贝’、‘佳红8号’、‘春展56’、‘秋光140’、‘秋光277’由北京市农林科学院蔬菜研究中心提供；‘西大1号’、‘西大2号’、‘樱黄1号’、‘樱黄2号’、‘樱红1号’由广西大学提供。感病对照为‘超级大明星’（市售），抗病对照为‘T117’，由南宁市立新公司提供。
1.1.2 试剂及PCR引物
2×Taq Master Mix 购自北京康为世纪生物科技有限公司，SanPrep柱式DNA胶回收试剂盒购自生工生物工程（上海）股份有限公司，PGEMT Easy Vector 试剂盒购自Promega，NaOH为国产分析纯试剂。
PCR引物参考AV494/CoPR[1314]委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 番茄培育及病毒接种
试验地点为广西农科院植保所网室内，网室常年种植有番茄黄化曲叶病毒病病株，且烟粉虱虫量较大。所有的番茄试验材料于2013年9月4日采用穴盘法进行育苗，待幼苗长至5～6 叶期于10月1日移栽至盆中，每个品种移栽20 株，移栽后，将盆栽苗放置于网室内进行自然接种，定期调查植株发病情况，10月19日进行第1 次调查，10月29日进行第2 次调查。
1.2.2 PCR检测及序列分析
采集网室内发病的‘超级大明星’番茄样品8份，用NaOH 粗提法进行DNA的提取[15]，将提取液用0.1 mol/L TrisHCl稀释50 倍进行PCR扩增。所得PCR产物克隆至PGEMT Easy Vector，进行序列测定，测序工作由北京诺赛基因组研究中心有限公司完成。
病情调查完成后，采集各品种未表现症状的番茄叶片各1份（如果一个品种中有多株未发病植株则作为混合样采集），用NaOH粗提法提取各样品的总DNA，将提取液用0.1 mol/L TrisHCl稀释50 倍进行PCR检测。 1.2.3 病情调查与分析
每个番茄品种调查20 株，采用Lapidot 和Friedmann[16]的病情分级标准记录病情和计算病情指数；按发病的严重程度划分为0、1、3、5、7、9共6个等级，病情分级如下：
0级：无症状；
1级：顶端叶片的叶缘轻微发黄；
3级：羽状复叶的小叶末端黄化和轻微卷曲；
5级：多数叶片黄化，卷曲，边缘上翘；
7级：叶片显著黄化，上翘，卷曲，植株矮化；
9级：叶片极度黄化，卷曲，植株严重矮化，甚至停止生长。
发病率（%）=（发病株数/调查总株数）×100；
病情指数（DI）=∑（级别代表值×本级病株数）/ （调查总株数×最高级代表值）×100；
抗病评价标准（参考叶青静等[17]）：
高抗（HR）：0
2 结果与分析
2.1 病情调查及抗病性评价
番茄植株接种后，每周观察番茄植株的发病情况，到第3周进行第1次调查，第5周进行第2次调查，计算各品种的病情指数并进行分析，参考抗病性评价标准进行抗病性鉴定（结果见表1）。
接种3 周后，除抗病对照未表现症状外，其余各番茄品种均表现出番茄黄化曲叶病毒病的典型症状；接种5 周后（表1），各番茄品种均有发病，发病最为严重的为‘金陵佳玉’与‘苏粉11号’，病情指数分别达到100与81.94；其余各供试品种病情指数在3.47～79.17。其中感病对照‘超级大明星’发病率达100 %，病情指数达到73.61，抗病对照‘T117’发病率为5 %，病情指数为0.69。
从表1可以看出，携带Ty3a基因的番茄品种抗性最好，大部分表现高抗，但也有例外，‘浙红1号’等4个品种表现抗病和中抗，‘K6’和‘苏粉11号’表现感病和高感；携带Ty1/Ty3 和Ty3基因的番茄品种抗性表现中等；而携带Ty2 基因的番茄品种抗性表现较差，表现抗、中抗、感病甚至高感。
2.2 病毒种类分子鉴定
在自然接种区共采集8份感病的‘超级大明星’番茄植株叶片样品，提取总DNA后，用AV494/CoPR引物进行扩增，PCR产物经纯化后连接至载体进行序列测定，测序结果经GenBank，BLASTN分析表明，感病植株均为中国番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl China virus，ToLCCNV）与中国番木瓜曲叶病毒（Papaya leaf curl China virus ， PaLCuCNV）复合侵染。
2.3 未表现症状番茄植株的PCR检测
各番茄品种中部分未表现症状的16 份番茄样品PCR检测结果表明，‘浙红1号’、‘樱粉1号’等未显症的番茄品种也携带病毒，仅有‘金陵甜玉’等几个品种未检测出病毒（图1）。
3 结论与讨论
烟粉虱传双生病毒（WTGs）在自然界由于基因重组突变容易导致病毒变异，从而引起品种抗性丧失，导致病害暴发流行[18]。据报道，世界上引起番茄黄化曲叶病毒病的病原超过57种，侵染我国番茄的双生病毒至少有10种[19]。江苏、北京等地的番茄黄化曲叶病毒病主要病原为番茄黄化曲叶病毒（Tomato yellow leaf curl virus，TYLCV）[6，9]，浙江省主要病原为TYLCV和台湾番茄曲叶病毒（Tomato leaf curl Taiwan virus，ToLCTwV）[7]，广西番茄双生病毒发生频率最高的是PaLCuCNV和ToLCCNV两种。试验结果表明，各番茄品种在广西南宁的抗性表现与其在品种提供单位所在地的表现差异较大，上海农科院与浙江农科院提供的‘K22’、‘浙红3号’等8个番茄品种表现为高抗，‘红贝贝’、‘春展56’等25 个番茄品种仅表现抗病和中抗， ‘樱红1号’、‘K6’ ‘金陵佳玉’、‘苏粉11号’等表现感病甚至高感。
番茄品种所携带的抗病基因与番茄品种的抗病性密切相关，含有Ty1、Ty2、Ty3、Ty4及Ty5其中1 个抗性基因的番茄品系，对番茄黄化曲叶病毒病都有一定抗性，但抗性水平不等[16]。本研究中上海农科院与浙江农科院的番茄品种普遍携带Ty3a抗性基因，江苏农科院的番茄品种除‘苏粉11号’与‘苏粉13号’携带Ty3a外，其余品种材料均携带Ty2基因，从试验结果可以看出，携带Ty3a基因的番茄品种普遍对PaLCuCNV和ToLCCNV有较好的抗性，携带Ty3 基因和携带Ty1/Ty3 基因的番茄品种对PaLCuCNV和ToLCCNV也表现出了较好的抗性，携带Ty3 基因的番茄品种对PaLCuCNV有较好抗性；另外，携带Ty2基因的番茄品种部分表现高感，部分表现中等及以上抗性，该研究结果与矫晓阳等[11]研究结果部分吻合，但含有Ty3a 的‘苏粉11号’和‘K6’抗性表现较差，原因还有待查明。
本研究对部分未显现症状的番茄植株进行了PCR检测，检测结果表明，这些番茄植株虽然未显现症状，但是同样受到病毒侵染，未发现免疫的番茄品种。
由于参试番茄株数偏少，接种压力偏大，也未进行测产，试验结果不一定完全反映各品种在田间的自然抗耐病性，仅供有关育种部门参考。
参考文献
[1] Harrison B D， Robinson D J. Natural genomic and antigenic variation in whiteflytransmitted geminiviruses （Begomoviruses） [J]. Annual Review of Phytopathology，1999，37：369398. [2] 蔡健和，秦碧霞，朱桂宁，等.番茄黄化曲叶病毒病在广西暴发的原因和防治策略[J]. 中国蔬菜， 2006（7）： 4748.
[3] 何自福，虞皓，毛明杰，等.中国台湾番茄曲叶病毒侵染引起广东番茄黄化曲叶病[J].农业生物技术学报，2007，15（1）：119123.
[4] 王玉，丁铭，杨莉，等. 侵染番茄的中国番木瓜曲叶病毒基因组结构特征[J]. 西南农业学报， 2010， 23（6）：19171922.
[5] 褚栋，侯丽霞，刘国霞，等. 山东省局部地区番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定[J]. 山东农业科学， 2010， 42（2）：1315.
[6] 赵统敏，余文贵，周益军，等. 江苏省番茄黄化曲叶病毒病 （TYLCD）的发生与诊断初报[J]. 江苏农业学报， 2007， 23 （6）：654655.
[7] 袁伟，万红建，王荣青，等. 浙江省番茄黄化曲叶病毒的分子鉴定及序列分析[J].分子植物育种，2013，11（2）：185192.
[8] 宋晰，师迎春，张世晨，等. 北京地区番茄黄化曲叶病病毒分离物测定及株系的初步鉴定[J]. 植物病理学报， 2013，43 （2）：113119.
[9] 田守波，张辉，于力，等. 上海地区番茄黄化曲叶病症状多样性与分子鉴定[J]. 上海农业学报， 2012， 28（3）：15.
[10]田兆丰，刘伟成，谢欢，等. 不同番茄品种对番茄黄化曲叶病毒的抗病性鉴定[J]. 植物保护学报， 2013， 40（1）：5660.
[11]矫晓阳，周雪平，杨悦俭，等. 不同番茄品种对5种植物双生病毒的抗病性鉴定[J]. 植物病理学报， 2013， 43（6）：655658.
[12]孔令娟，潘红，陈红辉，等. 番茄抗黄化曲叶病毒病品种筛选试验[J]. 北方园艺， 2011（22）：1315.
[13]Wyatt S D， Brown J K. Detection of subgroup Ⅲ geminivirus isolates in leaf extracts by degenerate primers and polymerase chain reaction [J]. Phytopathology， 1996， 86：12881293.
[14]何自福，虞皓，罗方芳. 番茄烟粉虱传双生病毒PCR检测[J]. 中国病毒学，2004，19（1）：6769.
[15]李正和，李桂新，谢艳，等. 云南番茄曲叶病是由烟草曲茎病毒引起的[J]. 病毒学报，2002，18（4）：355361.
[16]Lapidot M， Friedmann M. Breeding for resistance to whiteflytransmitted geminiviruses [J]. Annals of Applied Biology， 2002，140：109127.
[17]叶青静，周国治，王荣青，等. 番茄黄化曲叶病毒病抗性鉴定技术研究[J]. 分子植物育种， 2011， 9（2）：210217.
[18]Zhou X P， Liu Y L， Calvert L，et al. Evidence that DNAA of a geminivirus associated with severe cassava mosaic disease in Uganda has arisen by interspecific recombination [J]. Journal of General Virology，1997， 78：21012111.
[19]张辉.侵染我国番茄双生病毒种类鉴定及致病性分析[D]. 杭州：浙江大学， 2009.