【摘 要】
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[目的]构建IFN-λ1真核表达质粒，利用人胚胎肾HEK293T细胞表达系统，获得具有良好生物学活性的IFN-λ1重组蛋白。[方法]将IFN-λ1目的基因克隆到pcDNA3.1+载体NheⅠ与XhoⅠ多克隆位点构建pcDNA3.1-IFN-λ1分泌表达质粒，并将其转染到HEK293T细胞中；采用Ni-NTA亲和层析方法分离纯化重组蛋白，SDS-PAGE和蛋白免疫印迹（Western Blottin
【基金项目】
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河南省高等学校重点科研项目（22A310014）； 河南省科技攻关重点项目（222102310300）；
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[目的]构建IFN-λ1真核表达质粒，利用人胚胎肾HEK293T细胞表达系统，获得具有良好生物学活性的IFN-λ1重组蛋白。[方法]将IFN-λ1目的基因克隆到pcDNA3.1+载体NheⅠ与XhoⅠ多克隆位点构建pcDNA3.1-IFN-λ1分泌表达质粒，并将其转染到HEK293T细胞中；采用Ni-NTA亲和层析方法分离纯化重组蛋白，SDS-PAGE和蛋白免疫印迹（Western Blotting）检测IFN-λ1的表达与纯度；采用qPCR、WB结合显微镜观察检测IFN-λ1的生物学活性。[结果] IFN-λ1真核表达质粒构建正确，而且能够在HEK293T细胞中分泌表达重组蛋白，分离纯化的IFN-λ1能够有效地诱导ISG15、ISG54、ISG56、OAS1、TNFα、MX1和TRAIL等凋亡相关基因的表达，激活p38促凋亡信号通路，抑制水泡性口炎病毒对BHK-21细胞的感染。[结论]成功构建了pcDNA3.1-IFN-λ1真核表达质粒，能够在HEK293T细胞中分泌表达IFN-λ1重组蛋白；分离纯化的IFN-λ1重组蛋白具有潜在的抗肿瘤和抗病毒生物学活性，为进一步研究IFN-λ1的功能和临床应用奠定了基础。
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