【摘 要】
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建立了一个超声功率-超声时间的安全区域,在此范围内进行超声波辅助酶解时,能避免超声波随机断裂蛋白质;在此安全区域内采用响应面法获得最佳超声功率和超声时间。建立了超声
【机 构】
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华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,复旦大学生物医学研究院
【基金项目】
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国家科技支撑计划项目(No.2008BAI63B01);生物反应器工程国家重点实验室专项经费(No.2060204)资助
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建立了一个超声功率-超声时间的安全区域,在此范围内进行超声波辅助酶解时,能避免超声波随机断裂蛋白质;在此安全区域内采用响应面法获得最佳超声功率和超声时间。建立了超声波辅助Urea-Free试剂结合热变性快速酶解蛋白质的方法,将蛋白质依次进行10min超声波浴辅助Urea-Free还原烷基化反应、90℃热变性15min,超声波辅助胰蛋白酶酶解15s。应用此快速酶解方法鉴定3种典型标准蛋白质（牛血清白蛋白、细胞色素C和肌红蛋白）,在25min内达到与传统整夜酶解方法相同的鉴定结果,并获得更高的序列覆盖率。
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