【摘 要】
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目的 研究RNA干扰(RNAi)真核表达载体对前列腺癌细胞趋化因子CXC受体4(CXCR4)基因的抑制作用.方法 构建针对CXCR4基因的RNA干扰质粒表达载体,采用脂质体法转染前列腺癌PC-3m
【机 构】
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西安交通大学第一附属医院泌尿外科,华中科技大学同济医学院协和医院泌尿外科
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目的 研究RNA干扰(RNAi)真核表达载体对前列腺癌细胞趋化因子CXC受体4(CXCR4)基因的抑制作用.方法 构建针对CXCR4基因的RNA干扰质粒表达载体,采用脂质体法转染前列腺癌PC-3m、LNCaP细胞系,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测其对CXCR4 mRNA及蛋白表达的影响.结果 构建的重组真核表达载体在前列腺癌PC-3m、LNCaP细胞系中均抑制了CXCR4 mRNA及蛋白表达.与空白载体组细胞作对照,PC-3m细胞中小干扰RNA(siRNA)对CXCR4 mRNA的抑制率24、48 h分别为(87.8±10.2)%、(56.1±9.3)%,LNCaP细胞中siRNA对CXCR4 mRNA的抑制率分别为(56.9±8.8)%、(49.2±11.2)%,siRNA对PC-3m和LNCaP细胞蛋白抑制率,于24 h,前者为(64.7±6.7)%,后者为(58.7±11.6)%,与阴性载体转染组细胞比较,两组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RNA干扰真核表达载体可以有效地抑制两种前列腺癌细胞PC-3m、LNCaP细胞中CXCR4基因的表达.
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