评价线粒体通透性转运孔在脂肪乳逆转布比卡因大鼠心肌毒性中的作用。
方法培养H9c2心肌细胞,以105个/ml的密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为4组,每组6孔,每孔2 ml:对照组(C组)加入PBS 100 μl;布比卡因组(B组)加入布比卡因,终浓度为1 mmol/L;脂肪乳+布比卡因组(LB组)同时加入脂肪乳和布比卡因,终浓度分别为1%和1 mmol/L;脂肪乳+布比卡因+苍术苷组(LBA组)同时加入脂肪乳、布比卡因和线粒体通透性转换孔开放剂苍术苷,终浓度分别为1%、1 mmol/L和30 μmol/L,均孵育24 h。孵育结束后,采用Western blot法测定Bcl-2、Bax、磷酸化Bad(p-Bad)、caspase-3、活化的caspase-3、caspase-9、活化的caspase-9和细胞色素c(Cyt c)的表达水平,采用RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA、Bax mRNA、Bad mRNA、caspase-9 mRNA和Cyt c mRNA的表达水平。
结果与C组比较,B组Bax/Bcl-2比值、活化的caspase-3/caspase-3比值、活化的caspase-9/caspase-9比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值升高,p-Bad表达下调,Cyt c、Bad mRNA、caspase-9 mRNA和Cyt c mRNA的表达上调(P<0.05),LB组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与B组比较,LB组和LBA组Bax/Bcl-2比值、活化的caspase-3/caspase-3比值和活化、caspase-9/caspase-9比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值降低,p-Bad表达上调,Cyt c、Bad mRNA、caspase-9 mRNA和Cyt c mRNA的表达下调(P<0.05);与LB组比较,LBA组Bax/Bcl-2比值、活化的caspase-3/caspase-3比值、活化的caspase-9/caspase-9比值和Bax mRNA/Bcl-2 mRNA比值升高,p-Bad表达下调,Cyt c、Bad mRNA、caspase-9 mRNA和Cyt c mRNA的表达上调(P<0.05)。
结论脂肪乳逆转布比卡因大鼠心肌毒性作用的机制与抑制线粒体通透性转换孔的开放有关。