东方弧菌荧光酶的分离纯化和性质研究

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【摘要】

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东方弧菌518菌株于20℃摆床液体培养十六小时,菌数达最大,菌体内荧光素酶含量也较高,此时收获菌体.用超声波振动破碎细胞从中提取荧光酶粗液,经DEAE-纤维索和DEAE-sephadex柱

【作者】

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王安平朱文杰郑幼霞

【机构】

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华东师范大学生物系; 华东师范大学生物系上海 200062; 上海 200062; 上海 200062;

【出处】

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发光学报

【发表日期】

：

2004年期

【关键词】

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发光细菌细菌荧光素酶东方弧菌

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东方弧菌518菌株于20℃摆床液体培养十六小时,菌数达最大,菌体内荧光素酶含量也较高,此时收获菌体.用超声波振动破碎细胞从中提取荧光酶粗液,经DEAE-纤维索和DEAE-sephadex柱层析得到纯化的酶.用葡聚糖凝胶层析法测得该酶分子量为87000道尔顿,用SDS-PAGE法测得该酶两个亚基分子量分别为44000（α）和41000（β）. 该酶在pH6.8、18℃时活性最佳,对热不稳定.以FMNH₂为底物催化发光反应,最高发射波长为490nm左右.其光谱特征与文献报道的东方孤菌整体发光的光谱相一致.

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