猪圆环病毒单克隆抗体制备及检测方法的建立

来源 :吉林农业科技学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lang_tianhua
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本试验是从疑似猪圆环病毒Porcine circovirus(PCV)病的猪体中分离病料,提取DNA,应用PCR扩增及蛋白提纯技术,并以提取的Cap(PCV2-rCaP)蛋白作为免疫原,经纯化后,制备疫苗,对Balb/c系小鼠进行免疫,并将血清检测阳性鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0按5:1的比例融合,用酶联免疫吸附试验(ELISA法)和有限稀释法进行单克隆杂交瘤细胞的筛选,建立了单克隆抗体的辁测方法,最佳反应条件为:单克隆抗体的包被浓度为1:600,抗体的工作浓度为1:16倍.用阳性细胞株诱导制备腹
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