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全合成3α-羟类固醇脱氢酶基因密码子优化及酶性质研究

来源 :工业微生物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaochushang

【摘 要】

：

以NCBI报道的Comamonas testosteroni ATCC11996中3α-羟类固醇脱氢酶基因（3α-hydrox—ysteroid dehydrogenase gene，30r-hsd，AF092031．2）为模板，通过改变碱基序列但不影响酶的氨

【作 者】

：

王志臻 仝艳军 杨海麟 王武 

【机 构】

：

江南大学工业生物技术教育部重点实验室

【出 处】

：

工业微生物

【发表日期】

：

2014年1期

【关键词】

：

3α-羟类固醇脱氢酶 基因全合成 密码子优化 重组DNA表达 酶学性质 3α-hydroxysteroid dehydrogenase gene synthes 

【基金项目】

：

（1）江苏省科技计划项目（SBE201170578）（No.SBE201170578）,（2）江苏省科技计划项目（SBE201077545）（No.SBE201077545）,（3）江苏省自然科学基金（SBK201240329（No.SBK201240329）,（4）国家高技术研究发展计划（863计划）（2012AA021201）.

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以NCBI报道的Comamonas testosteroni ATCC11996中3α-羟类固醇脱氢酶基因（3α-hydrox—ysteroid dehydrogenase gene，30r-hsd，AF092031．2）为模板，通过改变碱基序列但不影响酶的氨基酸序列，将该基因相对于大肠杆菌的密码子适用指数由0．78提高到0．87，GC含量由原来的63．17降低到56．46，大幅度减少了Gc簇及寡聚A和T局域的存在，提高3α-hsd的可表达性。全合成基因定向克隆到pET28a载体中，并转化至大肠杆菌B12

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