对2例新生儿期发病的炎症性肠病(IBD)进行白细胞介素(IL)-10受体基因诊断，并探讨其发病机制。
方法研究对象为广州市妇女儿童医疗中心2010至2014年新生儿科和消化内科住院的2例疑诊新生儿期IBD同胞兄弟。先证者男，26 d，3.73 kg，出生后第9天出现反复发热，大便次数增多于2014年入院。先证者兄，6个月时因反复黏液脓血便5个月余，发热5 d于2010年入院，8个月死亡。采用PCR方法扩增先证者及其父母和姐姐IL-10受体基因组DNA，本院儿童保健科健康体检儿童的资料作为对照组。采用反转录PCR扩增先证者IL-10受体α亚单位(IL-10RA)，PCR产物进行双向序列测定，Western分析先证者IL-10RA蛋白以及IL-10刺激后磷酸化信号转导和转录激活因子3(P-STAT3)蛋白的表达。分离外周血单个核细胞(PBMC)并予脂多糖＋IL-10刺激培养后酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。
结果先证者及其兄均为IBD患者，基因组测序发现IL-10RA突变位点均为c.537G>A为同义突变，突变位点位于外显子4和内含子4连接处即CG/GT突变为CA/GT，先证者反转录PCR产物T-A克隆测序发现(c.519-537del GGTGCCGGGAAACTTCAC p．LYS173ASNfs*7)，证实为剪接突变。另外一条DNA链基变位点为(c.668G>C, p．C223S)，两个突变均为新基因突变，患儿父母均为突变基因的携带者，先证者及其兄均为复合杂合隐性遗传突变引起。Western印迹分析表明先证者和正常者均可表达IL-10RA，但是IL-10RA下游功能明显缺陷，IL-10刺激后下游P-STAT3无表达。先证者PBMC予脂多糖＋IL-10共刺激培养12 h后TNF-α为(2 100±356) ng/L，明显高于对照者[(200±50) ng/L，t＝9.154，P＝0.001]。IL-10对炎症的负反馈调节功能严重受损。
结论IL-10受体突变能够引起婴儿早期IBD，包括新生儿溃疡性结肠炎和克罗恩病，此型常规治疗效果较差，必须尽早诊断，尽早进行造血干细胞移植。