【摘 要】
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目的 探讨虎蝎化积膏联合顺铂诱导肝癌H22细胞凋亡作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为空白对照组和虎蝎化积膏组,连续给药3 d后,腹主动脉取血,制备虎蝎化积膏含药血清.将对
【机 构】
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湖南省中医药研究院 湖南 410006
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目的 探讨虎蝎化积膏联合顺铂诱导肝癌H22细胞凋亡作用及其机制.方法 将SD大鼠随机分为空白对照组和虎蝎化积膏组,连续给药3 d后,腹主动脉取血,制备虎蝎化积膏含药血清.将对数期H22细胞随机分为5组:正常组、空白血清对照组、顺铂组、20％虎蝎化积膏含药血清组、20％虎蝎化积膏含药血清+顺铂组,采用CCK-8法检测虎蝎化积膏含药血清对H22细胞增殖的影响;Hoechst 33258染色法观察各组H22细胞凋亡形态变化;高内涵细胞成像分析技术检测H22细胞内B细胞淋巴瘤2基因(Bcl-2)、凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt C)、B细胞淋巴瘤2关联蛋白X(Bax)、天冬氨酸蛋白水解酶9(caspase-9)蛋白表达变化.结果 与空白血清对照组比较,虎蝎化积膏含药血清组H22细胞增殖呈剂量-时间依赖关系的抑制作用,20％虎蝎化积膏含药血清的作用效果最佳.与空白血清对照组和单一用药组比较,20％虎蝎化积膏含药血清+顺铂组H22细胞呈现不同程度的核染色质聚集、核固缩,呈现出更典型的细胞凋亡特征;H22细胞内Cyt C、Bax和caspase-9平均荧光强度值明显增加(P<0.01、P<0.05),蛋白表达明显增多;Bcl-2平均荧光强度值明显降低(P<0.01、P<0.05),蛋白表达显著减少.结论 20％虎蝎化积膏含药血清联合顺铂可明显抑制肝癌细胞H22增殖,诱导其凋亡,作用机制可能与细胞内Bax和Bcl-2蛋白表达比例失调,胞质中Cyt C分泌增多,促使caspase-9蛋白表达增加有关.
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