3种贝类原虫多重荧光定量PCR方法的建立

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目的:建立能够同时检测单孢子虫、派琴虫和折光马尔太虫的三重荧光定量PCR方法。方法:根据基因库中单孢子虫、派琴虫和折光马尔太虫的基因序列,设计3对特异性引物和3条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,对反应条件和试剂浓度进行优化,建立能够同时检测单孢子虫、派琴虫和折光马尔太虫的三重荧光定量PCR方法。结果:该方法对单孢子虫、派琴虫和折光马尔太虫的检测敏感性分别达到40、400和40个模板拷贝数;此外抗干扰能力强,对单孢子虫、派琴虫和折光马尔太虫不同模板浓度进行组合,仍可有效地同时检测这3种原虫,对嗜水气单
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