TNF受体（P55）胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

来源 :病毒学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xie_e

【摘要】

：

TNF与多种疾病密切相关。为了获得大量具有生物学活性的可溶性TNF受体用以拮抗TNF的毒性作用，在原核表达系统中表达了TNFR（P55）的胞外区与TrxA的融合蛋白。将TNFR（P55）胞外区去信

【作者】

：

安乃莉徐春晓姚立红陈爱君曾革非张立国张智清

【机构】

：

中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室

【出处】

：

病毒学报

【发表日期】

：

2001年2期

【关键词】

：

TNF可溶性受体基因克隆融合蛋白大肠杆菌表达 tumornecrosisfactor solubleTNFreceptor fusionprotein

【基金项目】

：

国家高技术研究发展计划(863计划)

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

TNF与多种疾病密切相关。为了获得大量具有生物学活性的可溶性TNF受体用以拮抗TNF的毒性作用，在原核表达系统中表达了TNFR（P55）的胞外区与TrxA的融合蛋白。将TNFR（P55）胞外区去信号肽的前三个结构域基因克隆入融合蛋白表达载体pET-32a，在大肠杆菌BL21（DE3）中高效表达了TrxA-TNFR融合蛋白。表达产物以包涵体形式存在，经过变性和复性，并经镍金属鳌和柱亲和层析纯化，得到了纯度较高的可溶性受体蛋白的初纯品。免疫学实验及L929细胞体外实验均表明：该蛋白具有TNFR（P55）特异的

其他文献

鹅细小病毒主要免疫原性蛋白基因的克隆与序列分析

利用PCR技术,从纯化鹅细小病毒SYG99-5毒株鹅胚尿囊液中扩增出病毒主要免疫原性蛋白基因.将该PCR扩增片段克隆入pGEMR-T质粒载体的HincⅡ和SacⅠ位点之间,酶切分析筛选并进一

期刊

鹅细小病毒免疫原性蛋白克隆序列分析聚合酶链式反应VP3基因SOUTHERN杂交重组质粒gooseparvoviruspolymerasecha

副粘病毒融合蛋白活性位点中亮氨酸基因突变分析

为了确定副粘病毒融合蛋白（Ｆ）分子上活性位点中亮氨酸在Ｆ的细胞融合作用中的作用，弄清Ｆ融合细胞的分子机理，采用基因定点突变法创造一个酶切位点，用酶切反应初步筛选突变株，然后用ＤＮＡ序列

期刊

副粘病毒融合蛋白细胞融合亮氨酸paramyxovirus fusion protein cell fusion leucine gene

流行性感冒病毒鸡胚高产株的遗传特性分析

流行性感冒（流感）病毒的基因组由分节段的单股负链RNA组成，其中A、B型流感病毒含8个基因节段［1］。它的第4和第6节段分别编码病毒的血凝素（HA）和神经氨酸酶（NA），决定病毒的抗原性，其它6个

期刊

流行性感冒病毒鸡胚高产株遗传特性分析高产毒株基因突变influenzavirushigh-yieldingstraingenemutation

乙型肝炎病毒和黄曲霉素协同在裸鼠体内诱发人胎肝细胞癌变的研究

为了研究乙型肝炎（乙肝）病毒（HBV）和黄曲霉素（AFB1）在肝癌发生过程中的作用，用HBV感染人胚胎肝细胞移植至裸鼠背部皮下，以后每周注射AFB1，能诱发裸鼠成瘤，实验分为4组：A组为HV＋AFB1组，即用

期刊

人胚胎肝细胞乙型肝炎病毒黄曲霉素恶性转化癌变humanembryoniclivercellsHBVaflatoxinmalignanttrans

人免疫缺陷病毒1型Rev单链抗体细胞内免疫抗病毒基因治疗研究

应用抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗体细胞内免疫方法，研究在人Ｔ细胞和周围血淋巴单核细胞内抗病毒复制的效果，探讨细胞内免疫抗ＨＩＶ－１基因治疗的可行性。克隆抗ＨＩＶ－１Ｒｅｖ单链抗抗体（ｓＦｖ）基因，以逆转录病毒为基因载体，将名装

期刊

单链抗体细胞内免疫人免疫缺陷病毒-1single chain variable fragment antibody intracelluler immu

戊型肝炎病毒结构区ORF2蛋白在巴氏毕赤酵母中的胞内表达与纯化的初步研究

为寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗，利用甲醇营养型酵母pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒（HEV）结构区ORF2蛋白。采用PCR方法从HEV cDNA中扩增得到ORC2基因

期刊

戊型肝炎病毒开放读码框架异源基因表达蛋白纯化巴氏毕赤酵母胞内表达Hepatitis E virus open reading frame het

一个独特的RNA酶A抗性复合物在腺病毒L1 poly（A）位点的上游形成

在腺病毒交替的ｐｏｌｙ（Ａ）位点使用过程中，靠近主要晚期启动子的Ｌ１ｐｏｌｙ（Ａ）位点起着主导的作用。前期的实验已经发现，在Ｌ１ｐｏｌｙ（Ａ）位点的上游存在一个ＲＮＡ的抑制元件叶ＵＲＥ，缺失ＵＲＥ可以使模拟小基因的ｐｏｌｙ（Ａ）进入病毒晚期的感

期刊

腺病毒上游抑制元件RNA酶A抗性共价复合物adenovirus upstream repressive element poly(A) nuclea

人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化

研究中期永生化食管上皮细胞的表型、细胞遗传学和部份基因J的改变,以阐明癌前病变的特征.SHEE是该院用人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮,传至61代已开始有少量细胞

期刊

食管上皮永生化双相分比细胞遗传学癌前阶段人乳头状瘤病毒esophagealepitheliumimmortalizationbiphasicdi

利用小鼠模型评价含有5‘—GTCGTT—3’特征序列的人CpG寡脱氧核苷酸的免疫刺激活性

为了寻找合适的动物模型来评价人CpG寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）的活性，研究了CpG2006等含有5＇-GTCGTT-3＇特征序列的人CpG-ODN对小鼠的免疫刺激活性。在体外它们能够促进小鼠脾淋巴细胞

期刊

CPG寡脱氧核苷酸HBSAGTH1/TH2免疫应答小鼠模型免疫刺激活性特征序列CpG-ODN HBsAg Th1/Th2 responses

微小腺病毒载体介导的人凝血IX因子小基因的离体表达

将带有内源内含子的人凝血ＩＸ因子ｃＤＮＡ（ｈＦＩＸ小基因）构建到不含腺病毒基因而只带有反向末端重复顺序（ＩＴＲ）和包装信号ψ等顺式元件的微小腺病毒（ｍｉｎｉ－ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）载体ＧＴ２０７３上，得到载体ＧＴｉ’ＩＸ。将该载体与带有ｌａｃＺ报告基因的微小腺

期刊

微小腺病毒载体人凝血因子IX基因表达血友病miniadenovirus human clotting factor IX gene transfer

TNF受体（P55）胞外区基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

与本文相关的学术论文