【摘 要】
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目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白2(interferon induced transmembrane proteins 2,IFITM2)对脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)体外增殖的影响.方法 将重组表达质
【机 构】
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西北民族大学生物医学研究中心生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030;甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州730070
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目的 探讨干扰素诱导跨膜蛋白2(interferon induced transmembrane proteins 2,IFITM2)对脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)体外增殖的影响.方法 将重组表达质粒pcDNA3.1-IFITM2及靶向IFITM2的siRNA序列分别转染HEK293细胞,qPCR法和Western blot法检测IFITM2基因,mRNA的转录水平及蛋白表达水平.将EMCV按100 TCID50感染HEK293细胞,检测病毒拷贝数及病毒滴度,评价过表达及抑制表达IFITM2对EMCV增殖的影响.将EMCV按MOI=3感染过表达IFITM2的HEK293细胞,检测病毒拷贝数,评价IFITM2过表达对EMCV吸附及进入的影响.结果 转染重组表达质粒后,HEK293细胞中IFITM2基因mRNA转录水平及蛋白表达水平均明显升高(P＜0.001);转染siRNA序列后,两者均明显降低(P＜0.001).过表达IFITM2的HEK293细胞中的病毒拷贝数及病毒滴度明显降低(P＜0.05),抑制IFITM2表达的HEK293细胞中的病毒拷贝数及病毒滴度明显升高(P＜0.001).过表达IFITM2的HEK293细胞的吸附病毒粒子数变化差异无统计学意义(P＞0.05),进入病毒粒子数明显降低(P＜0.01).结论 IFITM2可抑制EMCV在HEK293细胞中的增殖,主要在病毒复制早期发挥作用.
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