香蕉组织培养过程中内生菌污染的控制

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dzluzd2009
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研究了体外培养一种孟加拉传统香蕉(Musa spp.Cv.Kanthali)的茎尖组织.茎尖的原始细胞表面经无菌处理(0.1%HgCl2处理12min),接种6~15d后外植体地下茎部分仍有微生物污染(大部分是细菌),杀死了85%的外植体.为确定无污染培养基,将等量外植体分别浸泡在含400mg/L氨苄青霉素和200mg/L庆大霉素(两种光谱抗生素)的培养基中1h.结果表明,经抗生素处理的外植体完全没有污染,但培养3周后不能再生.进行二次继代培养后,其中一部分外植体吸收了培养基并胀大,颜色由苍白转变成浅绿或深绿.三次继代培养后数天,不再观察到外植体的生长,所有经抗生素处理过的外植体都开始死亡.在未经抗生素处理的活外植体中,单个茎发育的最佳培养基是:MS+4.0mg/L BA+0.5mg/L KT+15%CW,平均生长时间为18~21d,但再生率很低,只有30%.茎细胞增殖的最佳培养基是:MS+4.0mg/L BA+2.0mg/L IAA+15% CW,每个茎平均只萌发3~4个芽.最后,在添加0.5mg/L IBA的一半浓度的MS培养基中,体外培养茎最大生根率达到90%.
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