【摘 要】
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目的 探讨晚期(P60) Npc1-/-小鼠肝脏功能和病理变化,为C1型尼曼-匹克病(NPC1)患者肝脏的病理发生及临床治疗提供实验依据.方法 小鼠称重后,眼内眦取血检测血清中乳酸脱氢酶(
【机 构】
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新乡医学院精神与神经医学研究院,河南新乡453003;河南省医用组织再生重点实验室,河南新乡 453003;新乡医学院生命科学技术学院,河南新乡453003;新乡医学院生命科学技术学院,河南新乡,45
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目的 探讨晚期(P60) Npc1-/-小鼠肝脏功能和病理变化,为C1型尼曼-匹克病(NPC1)患者肝脏的病理发生及临床治疗提供实验依据.方法 小鼠称重后,眼内眦取血检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性变化,评价Npc1-/-小鼠的肝功能变化;取肝组织进行石蜡和冷冻切片,通过HE染色和油红O染色评估肝脏组织的形态变化和脂肪储存情况,以及Masson染色评估肝脏组织胶原沉积情况;Real-time PCR和Western blotting分别检测肝脏组织促炎症因子,白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的mRNA和蛋白水平表达情况;TUNEL染色评估肝脏组织凋亡情况.结果 与Npc1+/+小鼠相比,Npc1-/-小鼠的体重及肝脏系数显著降低(P ＜0.001);LDH、ALT及AST活性显著升高(P ＜0.001);HE染色发现,Npc1-/-小鼠肝脏组织形态改变明显,出现大量泡沫细胞;油红O染色显示,Npc1-/-小鼠肝脏脂肪含量显著降低;Real-time PCR显示,Npc1-/-小鼠肝脏组织IL-1β、IL-6和TNF-α表达均显著升高(P＜0.01,P＜0.05和P＜0.001),同时,Western blotting也显示,3个因子的蛋白表达均显著升高(P＜0.05,P＜0.05和P＜0.01),证实Npc1-/-小鼠肝脏晚期发生炎症反应;Masson染色未发现Npc1-/-小鼠肝脏纤维化的发生;TUNEL染色显示,Npc1-/-小鼠肝脏组织凋亡细胞数量增加.结论 Npc1基因突变导致肝脏组织形态发生改变,大量的巨噬细胞聚集引发炎症反应,而炎症反应的发生可能是引起肝脏细胞凋亡和肝功能受损的重要途径之一.
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