基于PI3K/AKT/mTOR信号通路人参皂苷CK抑制Aβ诱导小胶质细胞活化和炎症反应的作用机制

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目的:基于PI3K/AKT/mTOR信号通路探讨人参皂苷CK对Aβ42活化小胶质(BV2)细胞抗炎及Aβ寡聚体吞噬作用机制。方法:利用10μmol/LAβ42寡聚体作用BV2细胞建立小胶质细胞活化模型,通过细胞实时监测系统观察人参皂苷CK对BV2细胞活力的影响;利用免疫荧光技术检测人参皂苷CK对BV2细胞介导Aβ吞噬能力,以及对BV2细胞不同表型标志物CD68、CD206蛋白的调控能力;通过ELISA技术测定人参皂苷CK对BV2细胞外Aβ42表达量的影响以及对炎症因子IL-4、IL-6分泌的调控水平;利用Western Blotting技术检测人参皂苷CK对BV2细胞内PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达的调控能力。结果:与空白组比较,模型组BV2细胞信号值降低,BV2细胞内Aβ42荧光表达强度显著减少(P<0.05),BV2细胞外Aβ42蛋白含量显著增多(P<0.05),BV2细胞内CD68的表达水平显著增加(P<0.05),CD206的表达水平显著降低(P<0.05),BV2细胞IL-4分泌水平显著降低(P<0.05),IL-6分泌水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,不同剂量人参皂苷CK作用后,BV2细胞信号值升高,BV2细胞Aβ荧光表达强度显著增加(P<0.05),BV2细胞外Aβ蛋白含量显著降低(P<0.05),BV2细胞内CD68表达水平显著降低(P<0.05),CD206表达水平显著增加(P<0.05),BV2细胞IL-4分泌水平显著升高(P<0.05),IL-6分泌水平显著降低(P<0.05)。结论:人参皂苷CK通过PI3K/AKT/mTOR信号通路,增加BV2细胞对Aβ的吞噬能力,促进活化BV2细胞由M1表型向M2表型极化能力,抑制炎症反应的产生。
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