【摘 要】
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为进一步了解Hus1蛋白在细胞周期检查点信号传导通路中的功能,用RT-PCR技术从NIH3T3细胞的总RNA中扩增出Hus1基因片段Hus1f(606～846 bp),使其在大肠杆菌中呈可溶性表达.用镍离
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为进一步了解Hus1蛋白在细胞周期检查点信号传导通路中的功能,用RT-PCR技术从NIH3T3细胞的总RNA中扩增出Hus1基因片段Hus1f(606～846 bp),使其在大肠杆菌中呈可溶性表达.用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化Hus1f蛋白,获得纯度较高的蛋白.用纯蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体.ELISA结果显示效价达到1:6400.Western印迹结果表明,该抗体可以与Hus1蛋白特异结合.通过免疫共沉淀实验发现,Hus1蛋白与Chk1蛋白之间存在相互作用,为进行信号转导通路的研究奠定了基础.
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