人羊膜间充质干细胞移植对大鼠随意皮瓣成活的影响

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目的

探索人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)移植促进超长宽比例随意皮瓣血管化,进而促进皮瓣成活的可能性。

方法

体外分离、培养、免疫组化及流式细胞术鉴定hAMSCs。hAMSCs植入皮瓣前用CellTracker™ CM-Dil进行标记。选用20只健康成年SD大鼠,于大鼠背侧左右分别构建8 cm×2 cm超长缺血随意皮瓣模型,皮瓣蒂部位于髂棘水平。皮瓣掀起后每只大鼠皮瓣分为左侧组[注射0.5 ml低糖杜氏改良培养基(LG-DMEM)]和右侧组(注射0.5 ml浓度为1×106/ml的hAMSCs)。术后7 d观察各组皮瓣的成活率。激光多普勒血流监测仪于术后即刻、24 h、48 h、4 d、7 d监测皮瓣蒂部和中部的相对血流值。通过组织学观察各组成活皮瓣毛细血管密度,荧光显微镜观察标记CellTracker™ -CM-Dil的hAMSCs在皮瓣内的分布及成活情况。

结果

皮瓣成活率左侧组为(50.6±2.2)%,右侧组为(70.9±2.1)%(P<0.05)。左侧组术后4 d及7 d皮瓣蒂部的相对血流值高于右侧组(P<0.05);皮瓣中部术后24 h、48 h、4 d、7 d的相对血流值均低于右侧组(P<0.05)。术后7 d皮瓣内微血管断面密度左侧组为(8.8±1.2)个/mm2,右侧组为(23.5±1.6)个/mm2,(P<0.05)。右侧组成活皮瓣组织在荧光显微镜下可观察到标记有CellTracker™ CM-Dil红色荧光染料的hAMSCs,可以证实hAMSCs在皮瓣内分布及存活。

结论

在超长随意皮瓣中、远部位应用hAMSCs可明显改善皮瓣的成活率,增加皮瓣下微血管重建的密度。

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