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实现产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)嘧啶核苷磷酸化酶(Pyrimidine-nucleoside phosphorylase,PyPNase)基因在大肠杆菌中的高效表达。用来源于产气肠杆菌的核苷磷酸化酶N末端序列与NCBI中公布的已知序列进行比对,设计一对引物,以该菌株基因组DNA为模板扩增出PyPNase基因。定向克隆到PET-28a(+)载体后转化到表达宿主大肠杆菌BL21中,筛选阳性克隆并测序,然后在LB培养基中优化发酵条件。结果:目的基因片断长度为1302bp。表达产物经