【摘 要】
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目的:建立和优化鉴别、纯度和效价测定等质量控制方法，提高和完善大肠埃希菌（Escherichia coli）、欧文氏菌（Erwinia carotovora）来源的门冬酰胺酶的质量标准。方法:考察了Xbridge protein BEH SEC（300 mm×7.8 mm, 3.5μm, 200?）和TSK G3000swxl（300 mm×7.8 mm, 5μm）2款色谱柱在纯度测定方法中的分离
【基金项目】
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北京市自然科学基金（7194337）；
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目的:建立和优化鉴别、纯度和效价测定等质量控制方法，提高和完善大肠埃希菌（Escherichia coli）、欧文氏菌（Erwinia carotovora）来源的门冬酰胺酶的质量标准。方法:考察了Xbridge protein BEH SEC（300 mm×7.8 mm, 3.5μm, 200?）和TSK G3000swxl（300 mm×7.8 mm, 5μm）2款色谱柱在纯度测定方法中的分离情况，并对流动相进行了优化；考察了效价测定方法中反应的量效关系和线性范围，探讨了斜率比模型和标准曲线法的效价计算方式。结果:以0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲液（pH 6.7）为流动相，采用Xbridge protein BEH SEC色谱柱进行分离，主峰前后各杂质峰分离度有了较大改善。2种菌种来源的门冬酰胺酶效价反应剂量在2～30 U·mL-1范围内均呈直线反应，r均大于0.995,标准曲线测定方法更为简单、准确，样品采用高低双剂量可以有效消除实验误差，双剂量测定偏差可小于±2.0%。结论:与绝对法相比，相对法在效价测定的准确度和重现性方面都有较大提高；优化后的纯度测定方法提高了杂质峰的分离度，可以更好地避免因积分方式带来的结果误差。
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