灯盏花素对缺氧/复氧诱导培养乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

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目的:探讨灯盏花素对缺氧/复氧诱导乳鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其作用机制。方法:利用原代培养的SD乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注(MI/R)模型,分正常对照组,模型组和灯盏花素3个剂量(25、50、100mg/L)预处理组。用MTT法测定细胞存活率,用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;用免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达;用Western-blot法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3的表达及细胞色素C(CytC)的释放。结果:缺氧复氧损伤后,与正常对照组比较,细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,灯盏花素3个剂量预处理后,细胞存活率增加,细胞凋亡率降低,且显示剂量依赖性。另外,缺氧复氧损伤,可使心肌细胞Bcl-2蛋白表达减少,CytC释放增加,Caspase-3活性增强,灯盏花素预处理后,Bcl-2表达增强,CytC释放减少,Caspase-3活性降低。结论:灯盏花素可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡,其抗细胞凋亡作用可能与其增加Bcl-2蛋白表达,减少CytC的释放,抑制Caspase-3活性有关。
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