猪小肠粘膜碱性磷酸酶的分离纯化及性质研究

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【摘要】

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猪小肠粘膜经过Tris-HCl缓冲液(pH8.5)充分溶解、正丁醇除脂、冷冻离心、真空冻干等步骤处理后,先后经过Phenyl High Performance疏水层析/DEAE Fast Flow阴离子层析/Sephacr

【作者】

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杨红谢智鑫刘丹怡刘容旭杨宏博韩建春

【机构】

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东北农业大学食品学院,黑龙江省绿色食品研究院

【出处】

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食品工业科技

【发表日期】

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2020年20期

【关键词】

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猪小肠粘膜碱性磷酸酶分离纯化层析蛋白二级结构 porcine intestinal mucosaalkaline phosphataseisolatio

【基金项目】

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BHA及碱性磷酸酶功能性研究(518003)

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猪小肠粘膜经过Tris-HCl缓冲液(pH8.5)充分溶解、正丁醇除脂、冷冻离心、真空冻干等步骤处理后,先后经过Phenyl High Performance疏水层析/DEAE Fast Flow阴离子层析/Sephacryl S-200凝胶层析纯化后得到猪小肠粘膜ALP(碱性磷酸酶),并对其蛋白二级结构及理化性质进行研究。结果表明:该酶经过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离得到ALP蛋白带,分子量约为57.0 kDa。该酶纯化倍数为68.2,比活力倍数为19.1 U/mg。利用圆

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