探讨反流性食管炎(RE)大鼠内脏传入神经的敏感性和酸离子敏感通道1(ASIC1)可能在其中发挥的作用。
方法选取雄性Sprague-Dawley大鼠60只，建立动物模型。将60只大鼠分为开腹对照组20只和RE组40只。对两组大鼠行常规食管病理活组织检查，通过1，1′-二(十八烷基)-3，3，3′，3′-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐示踪法定位食管特异性DRG神经元并进行全细胞膜片钳检测。用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR检测食管黏膜和脊髓胸椎第3～5节段(T3～T5)DRG中ASIC1的蛋白质表达和mRNA含量。统计学分析采用两独立样本t检验。
结果RE组大鼠体质量低于开腹对照组[(179.41±16.38) g比(290.75±22.20) g]，差异有统计学意义(t＝17.090，P<0.01)。RE组大鼠食管基底细胞增生，乳头延长，血管扩张、充血，炎性细胞浸润。全细胞膜片钳检测结果显示，RE组食管特异性DRG神经元静息膜电位较开腹对照组去极化显著[－(46.20±1.92) mV比－(51.60±1.52) mV]，差异有统计学意义(t＝4.930，P<0.01)；RE组阈电流低于开腹对照组[(18.00±13.04) pA比(80.00±12.25) pA]，差异有统计学意义(t＝7.750，P<0.01)。2倍、3倍阈电流刺激下，RE组动作电位发放频率增加[分别为(5.80±1.48)个比(3.00±1.58)个，(10.60±2.30)个比(5.20±1.92)个]，差异均有统计学意义(t＝2.890、4.030，P均<0.01)。蛋白质印迹法结果显示，RE组大鼠食管黏膜ASIC1表达低于开腹对照组(0.614±0.120比0.976±0.283)，差异有统计学意义(t＝2.885，P<0.05)；RE组和开腹对照组大鼠DRG中ASIC1表达(0.804±0.182比1.032±0.316)比较差异无统计学意义(t＝1.528，P>0.05)。实时荧光定量PCR结果显示，RE组大鼠食管黏膜ASIC1 mRNA含量低于开腹对照组(0.694±0.118比1.036±0.137)，差异有统计学意义(t＝4.642，P<0.01)；RE组大鼠DRG中ASIC1 mRNA含量与开腹对照组(1.002±0.074比0.985±0.120)相比差异无统计学意义(t＝0.294，P>0.05)。
结论RE组大鼠食管内脏传入神经敏感性增高，ASIC1可能对食管内脏痛觉过敏的形成具有负性调节作用。