苦荞黄酮-3-羟化酶截短体的原核表达与多克隆抗体制备

来源 :西北植物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：MUcrystal

【摘要】

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为了制备苦荞黄酮-3-羟化酶的多克隆抗体,该研究以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦荞黄酮-3-羟化酶基因截短体（truncated Flavanone-3-hydroxylase,TrF3 H）序列为基础,采用PC

【作者】

：

李玉萍邓丹丹张海纳李学俊陈鹏

【机构】

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西北农林科技大学生命科学学院

【出处】

：

西北植物学报

【发表日期】

：

2013年4期

【关键词】

：

苦荞黄酮-3-羟化酶原核表达多克隆抗体 tartary buckwheat flavanone-3-hydroxylase prokaryotic exp

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为了制备苦荞黄酮-3-羟化酶的多克隆抗体,该研究以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦荞黄酮-3-羟化酶基因截短体（truncated Flavanone-3-hydroxylase,TrF3 H）序列为基础,采用PCR扩增F3 H的截短序列编码区（TrF3 H）,构建了原核表达载体pET47b-TrF3 H,并转化入大肠杆菌Rosetta（DE3）plysS中进行诱导表达,将经钴离子螯合层析柱纯化后的目的蛋白切胶回收后制备了高效价的多克隆抗体。结果表明：pET47b-TrF3 H在大肠杆菌Rosetta

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