通过抑制PI3K/AKT信号通路，探讨该信号通路在一氧化氮对体外培养的大鼠肠神经干细胞增殖、分化的调控情况。
方法从孕15 d胚鼠肠道提取肠神经干细胞，传代后的肠神经干细胞分为LY294002(25 μmol/L)组、LY294002(50 μmol/L)组及空白对照组，培养48 h后，形态学观察分析各组的神经球大小情况，流式细胞仪检测各组肠神经干细胞nestin、BrdU标记的增殖细胞、子代细胞神经元Tuj-1染色阳性细胞百分比；传代后的肠神经干细胞分为50 μmol/l DETA/NO＋20 ng/ml EGF组、100 μmol/L L-NAME＋20 ng/ml EGF组及空白对照组(20 ng/ml EGF)，培养1 h后，利用Western Blot法检测及gel-pro图像软件分析各组P-AKT磷酸化水平。
结果形态学观察发现LY294002(50 μmol/L)组神经球较小、部分细胞有退化现象、LY294002(25 μmol/L)组次之、空白对照组神经球较大；流式检测发现LY294002(25 μmol/L)组与空白对照组相比，肠神经干细胞nestin百分比显著降低[(18.42±1.22)%比(27.44±1.08)%，(P<0.05)]，BrdU标记的增殖细胞百分比显著降低[(2.20±0.30)%比(12.27±0.59)%，(P<0.05)]，神经元Tuj-1百分比显著增加[(17.23±0.78)%比(13.98±0.53)%，(P<0.05)]；而LY294002(50 μmol/L)组与空白对照组相比，肠神经干细胞nestin百分比[(8.77±0.90)%比(27.44±1.08)]、BrdU标记的增殖细胞百分比[(0.62±0.03)%比(12.27±0.59)]及神经元百分比[(9.88±1.22)%比(13.98±0.53)%]差异均有统计学意义(P<0.05)。Western Blot法检测发现100 μmol/L L-NAME＋20 ng/ml EGF组P-AKT磷酸化的程度显著增强[(15.71±1.09)%比(39.42±1.02) %，P<0.05]，50 μmol/l DETA/NO＋20 ng/ml EGF组显著降低[(58.44±1.73)%比(39.42±1.02)%，P<0.05]。
结论一氧化氮能抑制肠神经干细胞增殖、促进其向神经元分化，其作用机制与抑制PI3K/AKT信号通路有关。