【摘 要】
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实时荧光定量PCR是一种快速用于鉴定基因表达量的方法,广泛用于微生物、植物和动物基因表达分析中。通过选取合适的内参基因β-actin构建珠子参实时荧光定量PCR体系,为珠子参
【基金项目】
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湖北省教育厅科学研究计划重点项目(D20181803)
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实时荧光定量PCR是一种快速用于鉴定基因表达量的方法,广泛用于微生物、植物和动物基因表达分析中。通过选取合适的内参基因β-actin构建珠子参实时荧光定量PCR体系,为珠子参及其近缘种的基因表达分析奠定基础。主要从两个最基本的要素进行体系优化,即引物浓度和模板浓度。优化先从模板浓度开始,设置模板浓度梯度分别为120ng/μL、24ng/μL、4.8ng/μL、0.96ng/μL、0.192ng/μL,基于扩增曲线和扩增效率的计算,得出扩增效率最高的一组,即为最优模板浓度。然后进行引物浓度优化,在最优模板浓
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