携带人血红素氧合酶-1基因重组腺病毒的构建及鉴定

来源 :西南国防医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tushudasha
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目的:构建人血红素氧合酶-1(hHO-1)重组腺病毒,为基因治疗心肌细胞缺氧性损伤提供可能。方法:将hHO-1 cDNA克隆于腺病毒穿梭质粒pSGCMV,得到重组质粒pSGCMV-hHO-1。采用位点特异性重组系统(Cre/Loxp)将pSGCMV-hHO-1与腺病毒骨架载体pBHGloxP△ E3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,生成带有hHO-1基因的重组腺病毒载体Ad-hHO-1。重组腺病毒质粒在293细胞中扩增,氯化铯梯度离心纯化。结果:经酶切鉴定和测序证实载体构建的正确
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