【摘 要】
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目的:为了研究布鲁氏菌Omp31分子的抗原性质,以及布鲁氏菌BLS蛋白质的聚合功能,通过融合PCR技术,制备布鲁氏菌Omp3148-74与BLS的融合蛋白质,并且进行蛋白质的纯化.方法:以猪
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目的:为了研究布鲁氏菌Omp31分子的抗原性质,以及布鲁氏菌BLS蛋白质的聚合功能,通过融合PCR技术,制备布鲁氏菌Omp3148-74与BLS的融合蛋白质,并且进行蛋白质的纯化.方法:以猪型布鲁氏菌Omp31基因和BLS基因作为研究对象,通过融合PCR技术构建重组表达载体,IPTG诱导融合蛋白质表达之后,利用His - tag亲和层析柱进行亲和纯化.结果:Omp3148-74 - BLS融合DNA长度为531 bp,编码177个氨基酸;加上原核表达载体上的His - tag标签,融合蛋白质的实际大小为25.07 kD,实验结果证实表达载体构建正确,重组表达正确.结论:通过融合PCR技术构建的重组子pET -28 -a - Omp3148_74 -BIS,可以在大肠杆菌中成功表达;His - tag亲和层析技术可以纯化到Omp3148_74 - BLS融合蛋白,而且蛋白质纯度较高.
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