人KLK1和EGFP双顺反子重组腺病毒构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

来源 :中国病理生理杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hua6952
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目的:构建携EGFP为报告基因和人组织激肽释放酶1(hKLK1)基因双顺反子的重组腺病毒(Ad-hKLK1-IRES—EGFP),并观察在自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)中的表达变化。方法:通过双酶切质粒pBlucscritⅡKS—hKLK1,将hKLK1基因定向克隆至带有IRES—EGFP的腺病毒穿梭质粒pDC316中,构建成重组穿梭质粒,将其与腺病毒骨架质粒pBHGloxE1,3Cre共转染293A细胞,经包装并获得重组腺病毒,用PCR、酶切及测序方法对其进行鉴定,测定病毒滴度;
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