【摘 要】
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目的 探讨共刺激分子超家族成员sPD-1和OX40对类风湿性关节炎(CIA)模型小鼠CD4+T细胞和血清细胞因子水平的影响,并探讨其机制.方法 用DBA/1小鼠建立CIA模型,分别免疫诱导35 d
【机 构】
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570311海口,海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)风湿免疫科;570311海口,海南省人民医院(海南医学院附属海南医院)检验科
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目的 探讨共刺激分子超家族成员sPD-1和OX40对类风湿性关节炎(CIA)模型小鼠CD4+T细胞和血清细胞因子水平的影响,并探讨其机制.方法 用DBA/1小鼠建立CIA模型,分别免疫诱导35 d和49d.小鼠分为9组,每组10只,包括正常对照组(NC组)、急性CIA组(A-CIA组,免疫诱导35 d)、慢性CIA组(C-CIA组,免疫诱导49 d)、sPD-1组(0.1 mg/kg,i.p.)、OX40组(15 mg/kg,i.p.)、sPD-1 +OX40组(0.1 mg/kg sPD-1联合15 mg/kg OX40蛋白,i.p.)、PD-1抑制剂AUNP-12组(0.2 mg/kg,i.p.)、siOX40组(60 μg OX40的siRNA注射,i.v.)、阴性对照siOX40-Ctrl(60 μg,i.v.).对CIA模型小鼠的踝关节进行H&E染色并进行病理和关节肿胀评分,ELISA检测sPD-1、OX40、IL-2、IL-5、IL-4、IL-17、INF-γ水平;流式细胞术分析PD-1和OX40阳性CD4+T细胞的水平.蛋白免疫印迹分析NF-κB信号蛋白表达.结果 sPD-1和OX40在CIA小鼠血清和CD4+T细胞上的表达均增加(均P＜0.01);sPD-1联合OX40注射明显促进CIA模型小鼠的细胞因子IL-2、IL-5、IL-4、IL-17、INF-γ的分泌,并上调p-P65的(P＜0.05),抑制sPD-1和沉默OX40对CIA小鼠的细胞因子IL-2、IL-5、IL-4、IL-17、INF-γ的分泌有显著抑制作用,并抑制小鼠滑膜组织IKKβ、p-P65的表达,上调IκBα的表达(P＜0.05).结论 sPD-1和OX40协同调控关节炎小鼠的炎症水平,sPD-1和OX40信号的失衡是关节炎动物机体免疫炎症的关键调节因素.
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