【摘 要】
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目的 探讨核转录因子kappaB(NF-κB)通路在血小板源性生长因子(PDGF)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖中的作用.方法 体外培养大鼠PASMC,随机分为3组:对照组(M199培养基
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目的 探讨核转录因子kappaB(NF-κB)通路在血小板源性生长因子(PDGF)诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖中的作用.方法 体外培养大鼠PASMC,随机分为3组:对照组(M199培养基培养)、PDGF刺激组(M199培养基与PDGF联合培养)、PDGF+小白菊内酯干预组(在M199培养基培养的基础上进行PDGF诱导,并予NF-κB抑制剂小白菊内酯干预).通过四唑盐(MTT)比色法和流式细胞术检测PASMC的增殖及细胞周期;通过免疫组织化学法检测NF-κB及其下游因子环氧化酶(COX-2)蛋白的表达并进行图像分析;通过荧光定量反转录-PCR检测NF-κB及COX-2 mRNA的表达;采用单因素方差分析进行统计处理,两两比较采用LSD法.结果 PDGF刺激组各时间点细胞MTT值均较对照组高(P均＜0.05),予NF-κB抑制剂小白菊内酯干预后,各时间点细胞MTT值均较PDGF刺激组明显降低(P均＜0.05);流式细胞术检测结果显示:PDGF刺激组S期和G2 +M期细胞比例较对照组增高(P＜0.05),予小白菊内酯干预后,S期和G2 +M期细胞比例较PDGF刺激组降低(P ＜0.05);PDGF刺激组NF-κB和COX-2蛋白及mRNA表达水平均明显高于对照组(P均＜0.05),予小白菊内酯干预后,NF-κB和COX-2的蛋白及mRNA表达水平较PDGF刺激组均下降(P均＜0.05).结论 PDGF能诱导PASMC增殖,促进细胞周期进程,增强NF-κB和COX-2蛋白及mRNA表达;NF-κB通路参与PDGF诱导PASMC的增殖过程.
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