【摘 要】
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在大肠杆菌BL21（DE3）中表达乙脑病毒（JEV）EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21（DE3）菌,经IPTG诱导蛋白
【机 构】
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河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室农业部动物免疫学重点实验室,河南农业大学牧医工程学院
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在大肠杆菌BL21（DE3）中表达乙脑病毒（JEV）EDⅢ蛋白、镍柱纯化并检测表达蛋白。采用RT-PCR方法扩增EDⅢ基因片段,构建重组表达载体p ET-28a-EDⅢ并转化到BL21（DE3）菌,经IPTG诱导蛋白表达,表达可溶性产物经NiNTA亲和层析纯化,最后通过SDS-PAGE和Western-Blot检测表达蛋白。结果成功构建原核表达载体p ET-28a-EDⅢ;EDⅢ蛋白在BL21（DE3）菌已表达,经Ni-NTA获得纯化蛋白,并经Western-Blot检测具有反应活性。
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