【摘 要】
：
独脚金内酯(strigolactones,SLs)是一类重要的植物激素和根际信号分子,在植物生长发育、根际真菌共生和寄生植物种子萌发等过程中都有重要作用.进一步探究SL的合成、运输和感知机制、调控植物生长发育的机理、与其他植物激素的交互作用及其类似物鉴定等,都需要定量检测方法学的辅助.目前,灵敏且高特异性的SL定量分析主要依赖色谱和质谱技术,对实验设备和操作人员的要求较高,且操作繁琐、耗时长、成本高,不适用于原位和实时检测.生物传感检测具有操作简便、响应快速、成本较低等诸多优点,具备持续、原位、实时和可视
【机 构】
：
湖南大学生物学院化学生物传感与计量学国家重点实验室植物功能基因组学与发育调控湖南省重点实验室,中国湖南长沙410082
论文部分内容阅读
独脚金内酯(strigolactones,SLs)是一类重要的植物激素和根际信号分子,在植物生长发育、根际真菌共生和寄生植物种子萌发等过程中都有重要作用.进一步探究SL的合成、运输和感知机制、调控植物生长发育的机理、与其他植物激素的交互作用及其类似物鉴定等,都需要定量检测方法学的辅助.目前,灵敏且高特异性的SL定量分析主要依赖色谱和质谱技术,对实验设备和操作人员的要求较高,且操作繁琐、耗时长、成本高,不适用于原位和实时检测.生物传感检测具有操作简便、响应快速、成本较低等诸多优点,具备持续、原位、实时和可视化监测分析物的潜力,是定量测定植物激素浓度和时空分布的新途径.现已报道的定量检测SL的生物传感器均基于合成生物学方法和内源性SL感知机制(SL与其受体结合后引起招募的抑制蛋白降解、受体自身降解或构象变化),通过荧光信号比值或强度变化实现对SL的定量分析,代表了SL定量检测技术的主要发展方向;适配体生物传感器由于其在小分子检测应用中的独特优势,未来很可能成为推进高灵敏度、高特异性、简单、快速的SL定量的关键点.这些生物传感器研究有助于以SL为代表的植物激素的作用机理研究,为植物株型和共生特性的定向遗传改良、根际寄生杂草防治等研究提供支撑,具有重要的科学意义和应用前景.
其他文献
基于超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)建立定量分析乙拌磷及其5个代谢物(乙拌磷砜、乙拌磷亚砜、内吸磷-S、内吸磷-S-砜、内吸磷-S-亚砜)的方法,应用该方法分析其在农产品(豌豆、芦笋、小麦、咖啡豆和花生)中的残留量.对样品前处理及色谱条件进行优化,样品经过乙腈涡旋提取(小麦、咖啡豆和花生先加水润湿),经盐析分层,取上清液经50 mg C18、50 mg PSA和50 mg NH2混合分散固相萃取净化后,经Thermo Syncronis C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm)
采用生物信息学方法分析人锌指蛋白219(zinc finger protein 219,ZNF219)的空间结构、理化性质、结构域、蛋白质修饰位点以及蛋白质相互作用关系等信息.分析结果显示,ZNF219为一种碱性不稳定亲水蛋白,无信号肽,属于非跨膜蛋白,定位于细胞核内,有9个zinc finger结构域,66个潜在的磷酸化位点,26个潜在的O-型糖基化位点,可能与HMGN1、MBD2等有相互作用.该研究通过多种生物信息学分析软件对ZNF219的结构及性质进行分析与预测,为研究其功能以及在癌症发生发展中的作
镉(cadmium,Cd)污染水稻田的综合防治对保障粮食品质安全非常重要,但目前生产上的降镉产品对水稻吸收镉的影响缺乏深入研究和系统评价.本研究以9311、湘晚籼12号等7个吸镉能力不同的水稻品种为材料,研究了镉离子亲和度不同的化学试剂和各种镉钝化肥料对水稻吸镉的影响,结果表明:EDTANa2能显著降低水稻幼苗对镉的吸收,土壤调理剂可以降低水稻幼苗对镉的吸收,不同镉钝化肥料都能减少水稻幼苗地上部分对镉的吸收和积累,但对根的影响具有差异;高镉土壤中,土壤调理剂、金无踪和EDTANa2可显著降低水稻各器官的镉
β-受体激动剂、β-阻断剂、蛋白同化制剂属于兴奋剂类药物,在动物饲养和屠宰过程中的违禁使用成为食源性兴奋剂类药物残留的来源,危害人类健康.目前 β-受体激动剂、蛋白同化制剂的检测较多,β-阻断剂检测报道较少,动物源食品中 β-阻断剂检测尚无标准方法.该文建立了超高效液相色谱-串联质谱测定猪肉、鸡蛋、牛奶中 β-受体激动剂、β-阻断剂、蛋白同化制剂三大类共9种食源性兴奋剂类药物残留的方法.样品中加入乙酸铵缓冲液(pH 5.2)和 β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶,在37℃条件下酶解16 h,酶解后的试样冷却至
BEST1又称BESTROPHIN-1,是位于视网膜色素上皮的一种膜蛋白,具有调节细胞体积、传导离子运输、维持细胞稳态等功能,在机体中发挥着重要的作用,且大量文献报道,该基因点突变能产生一系列视网膜退行性疾病.为了进一步研究该蛋白质的性质和功能,本研究利用生物信息学的方法对该基因序列及编码蛋白质序列进行生物信息学分析,结果表明,人BEST1位于第11号染色体,对应蛋白质是含有585个氨基酸的亲水蛋白,分子式为C3095H4722N829O808S21,具有四个跨膜结构,无信号肽,属于非分泌性蛋白,具有大量
西妥昔单抗具有较复杂的糖基化修饰,在抗原结合片段(Fab)和可结晶片段(Fc)的重链上都含有2个N-糖基化位点,其中Fab段的糖基化最为复杂,要研究清楚该位点的糖基化修饰,开发专一性切糖技术和稳定的聚糖比例分析方法是当前迫切需要解决的难题.以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达的西妥昔单抗为研究对象,使用 β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(Endo F2)开发了一种快速Fab段聚糖释放的方法,利用超高效液相色谱-高分辨质谱(UPLC-HRMS)进行了定性和聚糖比例分析.第一步对抗体原液进行非变性酶切,抗体原液经超纯水
婴幼儿奶粉配料中的植物油易受到链格孢霉菌污染,因而链格孢霉毒素(ATs)成为该类食品的重点检测对象.该研究建立了超高效液相色谱-串联质谱法快速检测婴幼儿奶粉中链格孢酚、链孢酚单甲醚、交链孢霉烯、细交链孢菌酮酸、腾毒素、交链孢毒素Ⅰ、细格菌素7种ATs的方法.通过参数优化确定最佳的质谱与色谱条件,选取BEH-C18色谱柱,以0.1％甲酸水溶液-乙腈为流动相,然后分别对提取条件(提取剂比例及提取方式)以及固相萃取条件(萃取小柱、洗脱液种类及体积、上样液pH)进行优化,确定使用乙腈-水(84:16,v/v)为前
沉积物中皮质类固醇激素(CSs)的痕量分析对探究其在环境多介质中的赋存状况和环境行为具有重要意义.然而目前相关研究主要集中在水样中糖皮质激素的测定,对基质更为复杂的环境固体样品中CSs的定量分析研究仍十分有限亦缺乏针对性、系统性,且目标物未能覆盖大多数常见常用的糖/盐CSs.本研究系统地优化了样品前处理过程和仪器分析中影响24种CSs测定准确性和灵敏度的条件,建立了采用超声波提取联合固相萃取技术对样品进行前处理,利用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定沉积物中24种CSs的分析方法.沉
以化妆品中23种防腐剂检测方法为例,探讨色谱柱选择对液相色谱方法测定结果的影响.参照《化妆品安全技术规范》甲基异噻唑啉酮等23个组分的检验方法,在2台不同的高效液相色谱仪上用15款不同品牌、型号的C18色谱柱检测23种防腐剂,计算色谱峰的理论塔板数和分离度,对23种组分的分离效果进行分析,并应用USP(United States Pharmacopeia)数据库和PQRI(Product Quality Research Institute)数据库等2种等效色谱柱选择方法,对不同色谱柱的分离效果及等效性进
该课程通过课前预习和小组讨论、以史为鉴、追根溯源、优化实验内容、改革实验方案、不断反思、持续改进等方法,激发学生学习兴趣,提升学生自主学习能力,启迪学生科学思维,提高学生独立思考能力,培养学生创新意识和合作意识.实践证明,生物技术综合实验实现了以知识传授为主,向以思维方式和独立思考能力提升为主的转变,使学生在获得专业知识的同时,学到了一种思维方式,使学生学习从被动的行为转化为自主的行为.