重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：semitic

【摘要】

：

构建重组hIL-10真核表达载体，探索在毕赤酵母中的表达，为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA，经EcoRl／Xba I双酶切后，将其亚克隆至同样双

【作者】

：

封建凯孙万邦陈富超黄俊琼罗军敏杜联峰姚新生王胜

【机构】

：

遵义医学院免疫学教研室

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

HIL-10 质粒构建毕赤酵母基因表达 Human interleukin-10 Plasmid construction Pichia pastoris

【基金项目】

：

贵州省教育厅自然科学基金重点培育项目（黔教科2008032）

下载到本地 , 更方便阅读

下载此文赞助VIP

声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架

论文部分内容阅读

构建重组hIL-10真核表达载体，探索在毕赤酵母中的表达，为进一步研究hIL-10生物学功能及临床应用奠定基础。PCR扩增目的基因hIL-10cDNA，经EcoRl／Xba I双酶切后，将其亚克隆至同样双酶切的载体pPlCZaA中，构建表达质粒pPICZaA-hIL-10；电转化法，将其转入毕赤酵母SMD1168，甲醇诱导Mut^＋型转化子基因表达；对目的蛋白进行检测及纯化。扩增出了目的基因hIL-10cDNA，重组质粒pPICZaA-hIL-10经酶切鉴定和序列测定正确；表达产物经SDS—PAGE分析在

其他文献

针药结合治疗风湿性肌炎

<正>风湿性肌炎是一种纤维组织的非化脓性炎症性病变,发生于肌肉的起止端、肌肉内及肌肉周围的纤维组织,以肌肉的疼痛、僵硬及运动障碍为主要症状。又称肌纤维织炎,

期刊

风湿性肌炎肌炎中医药疗法针灸疗法

世界宝藏探秘

人类发展的历史同时也是积累财富的历史。生产力的提高、社会形态的变迁、人们对精神生活的追求和思想境界的不断升华，无一不和财富的积累有关系。人类不断创造着财富，财富同时

期刊

宝藏生产力社会形态历史发展考古工作

改进职业院校技能型人才培养

一是创新技能型人才培养模式。技能型人才培养模式即是根据社会、经济和技术发展的需要，在一定的教育思想指导下，为实现职业教育技能型人才的培养目标和规格而采取的教育教学组

期刊

技能型人才培养职业院校人才培养模式新课程体系教学组织形式职业教育专业基础课技术发展

浅谈Solidworks在《机械制图》教学中的应用

【正】《机械制图》是工科院校的一门专业基础课,主要是培养学生具有一定的绘制和识读机械图样能力、空间想象和思维能力。传统的机械制图教学,以黑板演示为主,辅以挂图、模

期刊

机械制图SOLIDWORKS机械图样空间思维能力教学效果读图能力投影法二维工程图计算

浅谈变频调速中的抗干扰措施

【正】变频器包含电子元器件、计算机芯片,易受外界的电气干扰。在变频器内还有开关元器件、振荡电路、数字电路、触点、开关等,会产生连续的干扰频谱。这就是说,变频器投入

期刊

变频调速抗干扰措施干扰频谱振荡电路电磁兼容高次谐波计算机芯片数字电路电动机启动电气干扰

车工实习教学之我见

【正】在从事车工实习教学工作的几年时间里,笔者积累了一些教学经验。总的来看,笔者认为要搞好车工实习教学工作,要从以下几方面入手。一、认真而充分地备课课堂就是战场,要

期刊

车工实习教学工作实习时间实习教学无准工件毛坯实习要求教学计划工件加工质量实习课

运用酶切自连法分析鉴定肺炎链球菌体内诱导基因

肺炎链球菌是严重侵袭性感染和上呼吸道感染最重要的条件致病茵之一，分析鉴定体内诱导基因序列变得尤为重要。本研究利用酶切自连法成功从129个体内诱导表达的肺炎链球茵中获

期刊

酶切自连法自杀质粒肺炎链球菌体内诱导基因Enzyme Self-ligation method Suicide plasmid Streptococcu

细粒棘球蚴FABP基因的原核表达及蛋白鉴定

构建原核表达载体pET—FABP，优化表达条件，采用免疫学方法鉴定纯化的FABP融合蛋白。载体pMD19-T—FABP和pET-44a（＋）经EcoRI和Hindm双酶切，将回收的FABP片段与pET-44a（＋）连接，构建原核表

期刊

细粒棘球蚴脂肪酸结合蛋白原核表达Echinococcus granulosus FABP Prokaryotic expression

猪γ-干扰素的克隆表达及单抗的潜在应用

以刀豆素A（ConA）刺激长白猪外周血单个核细胞（PBMC），提取的总RNA为模板，采用一步法RT—PCR扩增出包含猪γ-干扰素（PoIFN-γ）完整基因的片段。将完整的PoIFN-γ基因亚克隆到pET-32a（＋）上，

期刊

猪Γ-干扰素融合表达单克隆抗体潜在应用Porcine interferon gamma Fusion expression Monoclonal ant

职业学校教学现状新体会

【正】在职业教育日新月异的今天,越来越多的学生走入职业院校的大门,选择适合自己的专业,学习一技之长,为自己未来的生存和发展奠定基础。同时,在学生中也出现了一大批混日

期刊

教学效果课堂纪律教师学分配工作课堂管理课堂教学授课语言谈话方式心理成长语言风格

重组hIL-10质粒构建及其在毕赤酵母SMD1168中的表达和纯化

与本文相关的学术论文