鹅SCD1基因真核表达载体构建及在肝细胞中的表达

来源 :上海交通大学学报:农业科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanlv512
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构建硬酯酰辅酶A去饱和酶1 (Stearoyl-CoA Desaturase l,SCD1)真核表达质粒pcDNA3.1(+)/SCD1,转染鹅原代肝细胞验证其对细胞中脂肪代谢的影响.根据鹅SCD1基因设计带有酶切位点引物,RT-PCR扩增SCD1基因,克隆至pMD-19T载体,亚克隆至pcDNA3.1载体,构建重组真核表达载体pCDNA3.1(+)/SCD1.酶切及序列测定测序正确后转染鹅原代培养肝细胞,荧光定量PCR检测SCD1基因的表达,并用油红O染色检测细胞中脂滴情况.结果:成功构建SCD1基因真
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