氟对成骨细胞中微小染色体维系蛋白3表达的影响

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目的 探讨氟对体外培养成骨细胞中微小染色体维系蛋白3(minichromosome maintenance deficient 3,MCM3)表达的影响.方法 采用免疫组织化学技术、原位杂交技术以及SYBR Green Ⅰ嵌合荧光实时定量PCR(real time RT-pCR)方法,检测不同剂量氟(0、5、10、20、40 mg/L,处理10 d)对体外培养成骨细胞中MCM3表达的影响.结果 0、5、10、20、40 mg/L各组细胞中均有MCM3蛋白及其mRNA表达,主要在细胞核中表达,与对照组比较,染氟实验组阳性表达强度高于对照组,阳性细胞数多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中10 mg/L组阳性表达高于其他实验组(P<0.05),呈现双向作用.real time RT-PCR检测显示,各组均可检测到MCM3 mRNA,相对定量比由对照组到高剂量组约为102∶259:145∶135∶100;染氟实验组中5、10、20 mg/L组表达量高于对照组和40 mg/L组,以5 mg/L组表达量最高,随着染氟剂量增加,基因表达量降低.结论 不同剂量氟对成骨细胞中MCM3表达的影响不同,低剂量氟可以促进MCM3的表达,随剂量增加氟的促进作用减弱。

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