分析微小RNA(miRNA,miR)-95与胃癌细胞增殖、凋亡的关系,并探讨其作用机制。
方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测70例胃癌手术标本的肿瘤组织及癌旁黏膜组织中miR-95的表达;记录患者的临床病理特征,分析miR-95与患者这些临床病理特征之间的关系。应用miR-95抑制物(anti-miR-95)转染人胃癌细胞株BGC823,检测转染前后细胞活性、细胞周期、凋亡率;同时应用Real-time PCR及Western blot检测增殖及凋亡相关基因增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、p21、生存素(Survivin)、Livin、Bad的表达。
结果胃癌组织中miR-95水平明显高于癌旁黏膜组织(t=-3.399,P<0.05)。miR-95表达与肿瘤的分化程度及淋巴结转移情况有关:分化差的肿瘤组织miR-95水平明显高于分化好者,存在淋巴结转移的肿瘤组织miR-95水平明显高于无淋巴结转移者(t=-3.021,P<0.05;t=3.348,P<0.05)。胃癌细胞株AGS、SGC7901、MKN45、BGC823及胃上皮细胞株GES-1中,miR-95在胃癌细胞株表达均高于GES-1,在BGC823细胞表达最高(F=5.998,P<0.05)。anti-miR-95转染BGC823后细胞的活性明显降低,细胞G0/G1期比例升高(F=39.758,P<0.01),而G2/M(F=10.349,P<0.05)、S期比例均降低(F=15.118,P<0.01);anti-miR-95转染后凋亡率明显增高(F=25.182,P<0.01);转染后增殖、凋亡相关基因PCNA、Cyclin D1、Survivin的mRNA和蛋白表达明显降低,而p21、Bad的mRNA和蛋白表达明显增高(P<0.05)。
结论胃癌组织中miR-95的表达增高,与肿瘤分化及淋巴结转移有关,miR-95可能通过调节一些增殖、凋亡基因表达而参与胃癌进展。